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基因工程的基本工具和基本操作程序
一、单项选择题
1.目前研究混杂DNA群体中的特异DNA序列,一般基于两种不同的方法,即DNA克隆和DNA分子杂交,如图所示。下列有关叙述错误的是()
A.方法①需要限制酶和DNA连接酶
B.方法②需要解旋酶和DNA聚合酶
C.方法③需要对探针进行特殊标记
D.方法①②③都遵循碱基互补配对原则
2.(2023·江苏宿迁高三质检)如图表示由不同的限制酶切割而成的DNA末端及相关的酶作用位点。下列叙述错误的是()
A.甲、乙、丙都属于黏性末端
B.甲、乙片段可形成重组DNA分子,但甲、丙不能
C.DNA连接酶的作用位点在图乙中b处
D.切割甲的限制酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子
3.(2023·江苏南通高三检测)基因工程利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DNA。限制性内切核酸酶BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ的酶切位点分别如图所示。下列分析错误的是()
A.构建重组DNA时,可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体
B.构建重组DNA时,可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体
C.图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后,含有两个游离的磷酸基团
D.用EcoRⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体,再用DNA连接酶连接,只能产生一种重组DNA
4.(2023·江苏泰州高三调研)引物的设计是影响PCR扩增反应的效率和特异性的关键因素,下列相关叙述正确的是()
A.引物的碱基数量越少则退火温度越低、目标DNA获得率越高
B.根据需要可在引物的5′端添加限制酶识别序列、点突变序列等
C.两种引物的退火温度差异较大,可减少引物与模板的非特异性结合
D.引物的GC含量越高,结合特异性越强,越利于目标DNA的扩增
5.利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。下列叙述错误的是()
A.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列
B.设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连
C.退火温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物
D.第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比例为15/16
6.在基因工程操作中,科研人员利用识别两种不同序列的限制酶(R1和R2)处理基因载体,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,结果如图所示。以下相关叙述中,不正确的是()
A.该载体最可能为环形DNA分子
B.两种限制酶在载体上各有一个酶切位点
C.限制酶R1与R2的切割位点最短相距200bp
D.限制酶作用于该载体会导致氢键和肽键断裂
7.(2023·江苏常州高三模拟)如图是快速RT-PCR过程示意图,①和②为逆转录酶催化的逆转录过程,③是PCR过程。据图分析,下列叙述错误的是()
A.逆转录酶具有DNA聚合酶的能力
B.③PCR过程只需要引物b
C.RT-PCR可检测基因表达水平
D.RT-PCR可检测新冠病毒等RNA病毒
二、多项选择题
8.ROP蛋白可以参与调节根毛和花粉管的生长。科研人员采用含有GFP(绿色荧光蛋白)基因的载体构建了ROPGFP的质粒,并利用农杆菌转化法将其转入植物体内。下列有关叙述正确的是()
A.外源基因在植物体中是否表达可通过绿色荧光来检测
B.GFP基因在植物体中表达说明生物体共用一套密码子表
C.ROPGFP质粒的构建需用到限制酶、DNA聚合酶和载体等工具
D.利用农杆菌转化法可以侵染大多数单子叶植物
9.(2023·江苏淮安高三模拟)下图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息,将二者构建的重组质粒导入受体菌并进行筛选。下列叙述错误的是()
注:AmpR:氨苄青霉素抗性基因;TetR:四环素抗性基因。
A.应选择的限制酶组合是酶F和酶G
B.所选用的受体菌含有AmpR和TetR基因
C.用含氨苄青霉素的培养基筛选出的是含重组质粒的受体菌
D.同时用三种限制酶处理图中质粒,电泳后可得到4个条带
10.某中学生物兴趣小组进行DNA的粗提取与鉴定时,选取如下实验材料:新鲜花椰菜、体积分数为95%的冷酒精、研磨液(含表面活性剂SDS、DNA酶抑制剂EDTA、适量的NaCl)、0.015mol·L-1的NaCl溶液、二苯胺试剂、蒸馏水以及其他必要实验器材。下列有关选择实验材料的理由,叙述正确的是()
A.新鲜的花椰菜DNA含量丰富,易获取
B.SDS具有瓦解植物细胞质膜的作用
C.DNA溶于冷酒精,而蛋白质等杂质不溶
D.EDTA可减少提取过程DNA的降解
三、非选择题
11.(2021·江苏,23)某小组为研究真菌基因m的功能,构建了融合表达蛋白M和t
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