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蛋白质研究技术.ppt

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**Porous:多孔的;pore:小孔**高速:25000rpm,89000g超速:50000-120000rpm,70000g**Sediment:沉淀物**One-dimensionalgels(forexample,analysisafteraffinitypurification)

Two-dimensionalgels(forexample,analysisafteraffinitypurification,bodyfluids,etc.)

Proteinchips(chipscoatedwith,forexample,proteinsorantibodies)

Proteins/proteincomplexesinsolution(identificationwithoutelectrophoresis)

如何寻找未知的相互作用蛋白质???第95页,共126页,星期六,2024年,5月?四、质谱仪分析相互作用蛋白质第96页,共126页,星期六,2024年,5月电喷雾电离质谱(ESI-MS)生物质谱仪:主要用以进行生物大分子质量与结构分析。以八十年代后期出现的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪和电喷雾四极质谱仪为代表。可对分子量高达几十万的生物大分子进行快速(几分钟一个样品)、精确(0.01%)和高灵敏度(10-15mol)的测定。第97页,共126页,星期六,2024年,5月质谱分析流程蛋白质信息数据库检索第98页,共126页,星期六,2024年,5月五、免疫沉淀与质谱仪分析蛋白质相互作用第99页,共126页,星期六,2024年,5月?六、质谱仪分析蛋白质相互作用网络图第100页,共126页,星期六,2024年,5月第101页,共126页,星期六,2024年,5月一.概述蛋白质组及蛋白质组概念的提出蛋白质组学形成的历史蛋白质组研究的主要手段第102页,共126页,星期六,2024年,5月人类基因组计划的完成3-4万个基因,30亿对碱基(解码生命)基因组是唯一的,但蛋白表达是变化的(解码生命)后基因组—蛋白质组的研究是21世纪生命科学的主要任务(WilkinsMRetal1997)1994年Williams提出测定有机体的基因组所表达的全部蛋白1995年Wilkins正式提出Proteome一词由一个细胞或一个组织的基因组所表达的全部相应的蛋白质,而研究蛋白质组功能为蛋白质组学(Proteomics)1、蛋白质组及蛋白质组概念的提出第103页,共126页,星期六,2024年,5月基因组转录组蛋白组ThestudyofproteinsexpressedbygenomesCompletionofthesequencingofthe1stdraftofhumangenomeindicatesthereareapproximately250,000proteinsinthehumangenomeOnly2-5%ofproteinsinhumangenomehavebeenidentified第104页,共126页,星期六,2024年,5月第105页,共126页,星期六,2024年,5月第106页,共126页,星期六,2024年,5月Expressionproteomics(表达蛋白组学)ThestudyofglobalchangesinproteinexpressionProteomicsCell-mapproteomics(细胞图谱蛋白组学)Thesystematicstudyofprotein-proteininteractionsthroughtheisolationofproteincomplexes第107页,共126页,星期六,2024年,5月2、蛋白质组学形成的历史1860FriedrichMiescheridentifiedacidandbasicproteincomponentsincellnucleiwhichwasmistakenlybelievedtocarrythegeneticmaterial

1970KenrickandMargolisIsoelectricfocusi

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