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倾注法实验报告
篇一:微生物实验报告
学号:
微生物学大实验班级:姓名:
1.培养基的配置及消毒灭菌
1.1通用培养基的配制(液体、固体、半固体三种)
1.1.1实验目的
(1)了解配制微生物培养基的原理和培养基的种类。
(2)掌握配制微生物通用培养基的一般方法和操作步
骤。
1.1.2实验原理
培养异养细菌最常用的培养基是牛肉膏蛋白胨培养基,
它是一种天然培养基。牛肉膏是牛肉浸液的浓缩物,含有丰
富的营养物质,它不仅能为微生物提供碳源、氮源,还含有
多种维生素。蛋白胨是酪蛋白、大豆蛋白或鱼粉等经蛋白酶
117
水解后的中间产物,含有?、胨和氨基酸等丰富的含氮素营
养物,因此完全能满足大多数异养细菌对营养的需要。
1.1.3材料和器皿
(1)试剂:牛肉膏、蛋白胨,nacl,1mol/Lnaoh,1mol/Lhcl。
(2)器皿:台秤,玻璃烧杯,搪瓷烧杯,三角瓶,量
筒,漏斗,试管,玻璃棒等。
(3)其他:ph试纸,牛角匙,牛皮纸,棉花,纱绳,
灭菌锅等。
1.1.4方法和步骤
1.配制牛肉膏蛋白胨培养基
(1)配方及配量:牛肉膏1.5g,蛋白胨5g,nacl2.5g,
琼脂(固体6g半固体
0.4g液体不加)蒸馏水500ml
(2)称取药品:按照营养基配方与配量分别称取各药
品,取少于总量的水于烧杯
中,将培养基成分(琼脂除外)逐一加入水中待溶。
(3)加热溶解:将烧杯放在石棉网上,用文火加热,
并不断用玻璃棒搅拌,使各
药品快速溶解,然后补水至500ml。
(4)调节ph:用1mol/lnaoh调ph至7.2—7.4.避免
调过碱,应缓慢加入,边
加入边搅拌,并用ph试纸测酸碱度值。
217
(5)分装:将配制好的培养基分装到相应的玻璃器皿
中,并在固体和半固体培养
基中加入琼脂,贴好标签,待灭菌。
1.2加压蒸汽灭菌法
1.2.1实验目的
懂得加压蒸汽灭菌原理及其安全使用的注意事项。
1.2.2实验原理
以加热密封锅体内的水和水蒸气的压力来提高锅体内
蒸汽温度而达到对物品灭菌的目的。
1.2.3方法和步骤
(1)加水:取出装料桶,往锅内加水至与搁架圈同样
高度为止。
(2)装料:将待灭菌的物品放入装料桶内并放回锅。
(3)加盖
(4)排气:在水煮沸后,以蒸汽驱赶锅内的空气沿排
气软管从排气阀中溢出,待空气排尽后,才可关闭气阀继续
加热。
(5)升压、保压、降压
(6)取料
1.2.4注意事项
(1)注意检查锅体和锅盖上的部件是否完好,并严格
按照操作程序进行,避免发生各类意外事故。
317
(2)灭菌时切勿擅自离开岗位,要注意压力表指针动
态;要按培养基中的营养成分的耐热程度来设置合理的灭菌
温度与时间,以免营养成分过多被破坏。
(3)务必待锅压下降到零后再打开排气阀和锅盖,否
则因锅内压力突然下降,使瓶装培养基或其他液体因压力瞬
时下降而发生复沸腾,从而造成瓶内液体沾湿棉塞或溢出等
事故。
(4)在放入灭菌料桶前,切记应往锅体内加入适量的
水,若锅体内无水或水量不够等均会造成在灭菌时引发重大
事故。
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