紫外可见吸收与分子荧光光谱法课件.pptxVIP

紫外-可见吸收与分子荧光光谱法;一分子吸收光谱的产生;ΔE电子ΔE振ΔE转;2分子吸收光谱;二紫外、可见吸收光谱;?分子对辐射能的吸收具有选择性，吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax。吸收曲线的形状、λmax及吸收强度等与分子的结构密切相关。;胆甾醇;?不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似，λmax不变，浓度越大，吸光度越大；在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大。;2Lambert-Beer定律;K:吸收系数;1)吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数,不随浓度c和光程长度b的改变而改变。在温度和波长等条件一定时，仅与吸收物质本身的性质有关。;3)可用来估量定量分析方法的灵敏度。εmax越大，定量分析的灵敏度越高。;§4-2有机物和无机物的紫外、可见吸收光谱;;1.σ→σ*跃迁

饱和键σ电子的能级跃迁

吸收光谱在远紫外区(或真空紫外区),λmax170nm。;3.跃迁;4.跃迁;5.常用术语;2)助色团

是能使生色团吸收峰向长波方向位移并增强其强度的官能团，是带有非键电子对的基团。;3)红移和蓝移(或紫移)

红移：吸收峰的波长λmax向长波方向移动。

蓝移(紫移)：吸收峰的波长λmax向短波方向移动。;（二）有机物的吸收光谱;2不饱和烃;2)共轭不饱和烃;3)羰基化合物;;K带:红移→220~260nm

R带:红移→310~330nm;;4)苯及其衍生物;?苯环上的取代基使B带简化、红移，吸收强度增大。;苯环与羰基双键

共轭

羰基双键：

K带和R带红移；

苯环：

B带简化，E2带与

K带重合且红移;5)稠环芳烃及杂环化合物;二无机物的吸收光谱与电子跃迁

1电荷转移吸收光谱;2配位场跃迁;;三影响紫外、可见吸收光谱的因素

1共轭效应的影响;空间阻碍使共轭体系破坏，λmax蓝移，εmax减小。;2取代基的影响;3溶剂的影响;无溶剂效应;;3)溶剂的选择;§4-3紫外-可见分光光度计;;;二紫外-可见分光光度计类型;;2双波长分光光度计;测量信号：;};§4-4紫外-可见吸收光谱法的应用;维生素A1,λmax:326nm;A;2计算不饱和有机化合物λmax的经验规则;P80例1;例：水芹烯有两种异构体，经其他方法测定其结构为A及B。其紫外光谱：α体的λmax为263nm(εmax??2500)，β体的λmax为231nm(εmax为900)。试问A及B何者为α体，何者为β体？;;;2)斯科特(Scott)规则;二结构分析;2判别互变异构体;三纯度的控制和检验;四定量分析;;;△A;§4-5分子荧光和磷光分析;T1;(激发);激发态分子从三重激发态的最低振动能层经辐射回到基态的过程;?激发光谱：将荧光（磷光）的发射波长固定在最大发射波长处,改变激发波长并测定相应的荧光（磷光）强度，由此得到的荧光(磷光）强度与激发波长的关系曲线即为激发光谱。;相对强度;荧光发射光谱的特点：;1)跃迁类型;2)共轭效应;3)刚性平面结构;芴(=1.0);4)取代基效应;（二）荧光光谱仪;荧光

检测器;（三）荧光定量分析;苯酚的荧光标准曲线;3)散射光的影响