重庆地区儿童结核分枝杆菌临床分离株基因分型的初步研究及耐药相关性分析.pdfVIP

重庆地区儿童结核分枝杆菌临床分离株基因分型的

初步研究及耐药相关性分析

引言

结核病是一种由结核分枝杆菌引起的传染病，可以感染人体的任何

器官，但肺结核最常见。在全球范围内，结核病是一种常见的疾病，每

年导致超过100万人死亡。尽管重庆地区结核病的发病率相对较低，但

对儿童的危害尤其严重，因此对儿童结核的研究尤其重要。

目的

本文研究了重庆地区儿童结核分枝杆菌（MTB）的基因分型和耐药

性。通过这一研究，我们希望了解重庆地区儿童结核病的病原菌种类和

分布情况，并为重庆地区结核病治疗和预防提供参考。

材料和方法

病例选择：我们从2015年1月至2017年12月间收集了224例重

庆地区儿童结核患者的临床样本，其中包括痰液、血液、肝脏、肺组织

等。样本采集得到本地卫生计生委批准的85例真正的抗结核治疗前原发

肺结核患者中1例初治失败患者和65例肺结核患者、34例淋巴结结核

和9例骨髓结核患者。

临床分离：每个样本均进行了MTB的分离。痰液样本先进行福尔马

林-乳清液法测验，空气吸入，每依靠某一特异性抽屉结构或染色体结构

指示发育后的结节型菌，培养库文件系统中进行初步诊定并区分分支杆

菌和非分支杆菌菌群。MTB分离后，在LJ培养基上进行培养，并验证

MTB的特异性。如果菌株被检测为MTB，我们将继续对其进行以下实验。

基因分型：通过polarcordon-区域长度多态性（PC-RFLP）技术进

行基因分型。将MTB菌株DNA和100UPvuII酶反应，然后在0.8％琼

脂糖凝胶中电泳，通过计算PC-RFLP带型的带型号码，最终得出不同的

MTB菌株的基因型。

耐药性检验：用药敏测试方法对MTB菌的耐药性进行检测。为确保

结果的准确性，我们在采集样本前两周之内停止抗结核药物治疗，以减

少药物的干扰。对于初次感染的患者，如果症状控制不佳，则在采集样

本时进行药物敏感性测试。我们使用LJ培养基和常用药物，如吡喹酮酸、

异烟肼、利福平和链霉素等，来确定MTB菌株的耐药性。

结果

本研究共分离出了224株结核分枝杆菌。通过PC-RFLP技术，我们

检测出了50种不同的基因型。其中，20种基因型只出现了一次，表明这

些MTB菌株非常罕见。其他的基因型主要分布在P、H和L线和其他3

个传统的MTB原型之间。耐药性药物检测结果表明，有26株MTB菌株

表现出至少对一种药物的耐药性，其中6株表现出多种药物的耐药性。

对多药耐药的6株菌株进行基因分型，发现它们具有相同的基因型，并

且都属于L1线。

讨论

本研究结果表明，重庆地区儿童结核分枝杆菌的基因型非常多样化，

显示出了很大的遗传变异。同时，我们还发现一些罕见的基因型，这些

特殊的基因型需要更进一步的研究来确定它们是否具有特殊的流行病学

特征和生物学特征。耐药性检测发现26%的MTB菌株表现出至少对一种

药物的耐药性，其中约58%的抗药菌株都表现出对异烟肼和利福平的耐

药性，这表明这两种药物已经在重庆地区使用过度。

结论

本研究发现重庆地区儿童结核菌分枝杆菌的基因型非常多样化，并

且存在少数罕见的菌株。我们还发现了高比例的耐药菌株，这表明抗结

核药物在重庆地区的使用需要谨慎。这一研究对于了解重庆地区儿童结

核病的菌源特征具有重要的意义，也为结核病的治疗和预防提供了参考。