转基因食品与安全性.ppt

分类：1、半定量PCR法(semi-quantitativePCR)；2、定量竞争PCR法(quantitativecompetitivePCR)；3、实时定量PCR法(real–timequantitativePCR）第96页,共102页，星期六，2024年，5月特点：此类方法在实验室阶段基本成熟；只是要对不同物种、品种的不同性状基因研究具体的条件；但它对设备及技术要求较高；费时；准确性也需进一步确定。第97页,共102页，星期六，2024年，5月（3）“DNA芯片”技术方法：通过微加工和生物化学技术，使成千上万的基因集成在lcm2的芯片上，将样品制备、化学反应到检测的整个过程集成化以获得所谓的微型全分析系统(micrototalanalyticalsystem)。第98页,共102页，星期六，2024年，5月此方法于80年代提出设想，90年代进行实质性科研．现在进行的商业化生产芯片主要在医学上应用，且品种极少。特点：可以预见，它在转基因作物上的应用普及将极大地提高分析的自动化和速度，并降低成本和污染等。第99页,共102页，星期六，2024年，5月检测趋势1：随着转基因食品商品化进程加速，越来越多的目的基因将被转入种类更加繁多的食品作物中，使用的启动子、终止子也将不再局限于目前的几种。因此，常规PCR检测将可能造成越来越多的假阴性，能同时检测多个启动子、终止子、目的基因、内参照基因的基因芯片将成为必需。第100页,共102页，星期六，2024年，5月检测趋势2：建立快速可靠的GMF检测手段，也成为卫生监管部门面临的刻不容缓、必须解决的问题第101页,共102页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第102页,共102页，星期六，2024年，5月****转基因食品不能证明与对应的参照食品实质等同时，要做进一步的毒理学试验，

试验主要包括：(1)毒物动力学试验，了解它的吸收、分布、代谢及排泄等情况(2)遗传毒性试验，包括体外试验和体内致突变试验(3)潜在致敏性试验第64页,共102页，星期六，2024年，5月(4)基因传递与稳定性试验。检查是否导入的基因向人畜胃肠道中存在的微生物中转移和表达(5)微生物定植和微生物致病性试验。对本身是活菌或含有活菌的新型食品要评价这两项指标第65页,共102页，星期六，2024年，5月(6)啮齿类90天喂养试验。其中注意遗传毒性、神经毒性、免疫毒性及生殖毒性(7)验证对人类的安全性；一定时期后，对转基因食品安全性的再评价。包括耐受量、肠道群菌谱及数量等。第66页,共102页，星期六，2024年，5月Safetyassessmentofthemarkergene

标记基因的安全性评价

第67页,共102页，星期六，2024年，5月标记基因的用处？转基因作物在实验室阶段经常要用抗生素作为抗性标记进行筛选；选择标记基因用于植物遗传转化中促进转化细胞、组织和转基因植株的生长。第68页,共102页，星期六，2024年，5月Thenormalmarkergene:

常见标记基因:

(1)markergeneforkanamycinresistance

抗卡那霉素基因

(2)markergenefornewhygromycinresistance

抗新潮霉素基因

(3)抗草甘膦基因

(4)GUS报告基因

第69页,共102页，星期六，2024年，5月公众为什么关心标记基因的安全性？尽管国际社会认为大部分常用的标记基因是安全的，但仍有一部分标记基因的安全性未能确定；所谓的安全使用的标记基因，仅指基因本身，并不包括启动子、终止子、基因多效性及其它多种可能的次生效应，次生效应可因插入位点不同而异，目前人类无法预测基因插入位点和准确地做到基因的定位整合。第70页,共102页，星期六，2024年，5月标记基因涉及的安全性问题：标记基因及其编码蛋白的直接毒性；蛋白代谢产物的毒理学安全性；蛋白质的过敏性和基因水平转移的可能性第71页,共102页，星期六，2024年，5月标记基因的评价内容第72页,共102页，星期六，2024年，5月1、Whetherthelabeledgeneistoxictohumandirectly标记基因有无直接毒性任何DNA都由4种碱基组成DNA在小肠中仅有200mg标记基因DNA在结肠中仅有0.3-1pg，在消化道中是微不足道的DNA在消化道中很快被降解WHO、FDA实验证明食物中的转基因DNA本身无安全性问题第73页,