《微生物的实验室培养》（第2课时）名师学案2 (1).docVIP

山西大学附中高中生物技术实践导学设计

专题22.1微生物的实验室培养（第二课时）

制作人：韩晓静审核人：郭晓虎

【学习目标】

知识目标：1、说明纯化大肠杆菌的基本原理。

2、应用无菌技术的操作。

能力目标：能够使用平板划线法和稀释涂布平板法纯化大肠杆菌。

情感态度与价值观目标：形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。

【学习重难点】无菌技术的操作

【学习过程】

自主学习

微生物的接种方法很多，最常用的是和。

（1）平板划线法是通过在琼脂固体培养基表面的操作，将聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。

1.将在酒精灯火焰上灼烧直至。

2.在火焰旁接种环，并打开盛有菌液的试管的棉塞。

3.将通过火焰。

4.将冷却的接种环伸入到中，沾取。

5.将试管口再次，并塞上棉塞。

6.将皿盖打开一条缝隙，把接种环，划3-5条平行线，盖上皿盖，注意不要。

7.灼烧接种环，冷却后从划线。重复上述过程，完成3、4、5区域内划线。注意不要将相连。划线操作结束，灼烧。

8.将平板培养。

（2）稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的，然后将的菌液分别到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

1.系列稀释操作：

①将分别盛有mL水的6支试管，并按101-106顺序编号。

②用移液管吸取mL培养的菌液注入101倍稀释的试管中，用手指轻压移液管上的橡皮头，吹打次，使菌液与水充分混匀。

③从101倍稀释的试管中吸取mL稀释液，注入到倍稀释的试管中，重复第二步的混匀操作，依次类推，直到完成最后一只试管的稀释。

2.涂布平板操作：

①将涂布器浸在盛有的烧杯中。

②用移液管取少量菌液（不超过mL），滴加到培养基表面。

③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上，待酒精燃尽后，冷却。

④用将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使菌液。

课堂探究

【思考1】观看平板划线法操作的教学视频，思考以下几个问题。

1.数一数，本次操作灼烧接种环几次?每次灼烧目的相同吗？请写出原因。

2.灼烧完接种环，为什么要等其冷却后再进行划线？

3.平板划线时，不能划破培养基的原因？

4.连续划线的目的是什么？为什么总是从上一次划线的末端开始划线呢？

【思考2】观看稀释涂布平板操作的演示视频，思考以下几个问题。

1.进行系列稀释操作时应如何确定恰当的稀释倍数？

2.在整个实验中我们应该如何保证无菌操作？

3.操作结束后，为什么要将一个未接种的培养基和一个接种的培养基放在一起培养？

课外探究

【小试牛刀】请结合本节课所学知识，尝试设计一个分离纯化泡菜中乳酸菌的实验。

（要求：可行性强，可适当创新，体现对照和重复原则，但必须以遵循接种的基本原理和无菌操作为前提，以获得纯化的酵母菌为目标，并以安全为第一保障。）

【巩固练习】

1.有关平板划线操作正确的是（）

A、使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌

B、打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞

C、将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可

D、最后将平板倒置，放人培养箱中培养

2.以下是某位同学撰写的实验室培养大肠杆菌的实验方案：

材料用具及实验环境等的消毒和灭菌→制备牛肉膏蛋白胨固体培养基→培养基灭菌→倒平板→分离纯化大肠杆菌→培养、每隔三天观察记录菌落情况→菌种保藏

结果分析与评价：1、该实验目的是培养大肠杆菌，无需进行对照实验，培养基上出现的菌落都是大肠杆菌的菌落2、将分离得到的大肠杆菌菌种放在4℃的冰箱中长期保藏

请指出其中三处错误并加以改正：

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