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高中生物单克隆抗体知识点--第1页
高中生物单克隆抗体知识点
单克隆抗体是高中生物选修教材中动物细胞工程教学内容的重点
和难点,有哪些知识点要记住?下面店铺给大家带来高中生物单克隆抗
体知识点,希望对你有帮助。
高中生物单克隆抗体基础知识点
一、区别单克隆抗体和多克隆抗体
多克隆抗体:抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞
合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球
蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。
当病原体入侵人体,能够刺激机体免疫系统产生大量的多种抗体,
那么这一堆抗体就是多克隆的。
单克隆抗体(MAb):是针专一的抗原决定簇产生的抗体,单克隆
技术又名杂交瘤技术,起源于1975年,由G.KÖhler和Milstein创
立。主要原理是利用产生抗体的B细胞与肿瘤细胞杂交融合成杂交瘤
细胞,生产抗体。
此类抗体是专一的,或者说是同一种蛋白质,因此是单克隆的。
二、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要步骤
(1)抗原制备;
(2)免疫动物;
(3)免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备;
(4)细胞融合;
(5)杂交瘤细胞的选择培养;
(6)杂交瘤细胞的筛选;
(7)杂交瘤细胞的克隆化;
(8)单克隆抗体的检定;
(9)分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立;
(10)单克隆抗体的大量制备。
三、杂交瘤技术制备单克隆抗体的具体过程
1、免疫动物免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏B
高中生物单克隆抗体知识点--第1页
高中生物单克隆抗体知识点--第2页
淋巴细胞的过程。一般选用6-8周龄雌性Balb/c小鼠,按照预先制
定的免疫方案进行免疫注射。抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周
免疫器官,刺激相应B淋巴细胞克隆,使其活化、增殖,并分化成为
致敏B淋巴细胞。
2、细胞融合采用眼球摘除放血法处死小鼠,无菌操作取出脾脏,
在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液。将准备好的同系骨髓瘤细胞与
小鼠脾细胞按一定比例混合,并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇
作用下,各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞。
3、选择性培养选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一
般采用HAT选择性培养基。在HAT培养基中,未融合的骨髓瘤细胞因
缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,不能利用补救途径合成DNA
而死亡。未融合的淋巴细胞虽具有次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,
但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。只有融合的杂交瘤细胞由
于从脾细胞获得了次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶,并具有骨髓瘤细
胞能无限增殖的特性,因此能在HAT培养基中存活和增殖。
高中生物易错知识点
●使能量持续高效的流向对人类最有意义的部分
●能量在2个营养级上传递效率在10%—20%
●单向流动逐级递减
●真菌PH5.0—6.0细菌PH6.5—7.5放线菌PH7.5—8.5
●物质作为能量的载体使能量沿食物链食物网流动
●物质可以循环,能量不可以循环
●河流受污染后,能够通过物理沉降化学分解微生物分解,很
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