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蕙兰CfCIN基因克隆及其功能分析

摘要

蕙兰CfCIN基因在最近的研究中被发现与植物的光合作用和生物节

律调控密切相关。该论文旨在通过基因克隆和功能分析，揭示蕙兰CfCIN

基因在植物生长发育中的重要作用。首先，我们使用PCR技术从蕙兰基

因组中扩增CfCIN基因的全长序列。然后，通过构建表达载体并在拟南

芥中进行转化，得到了过表达和沉默CfCIN基因的转基因植物。最后，

我们通过一系列的生理生化试验和表型分析，探究了CfCIN基因对植物

光合作用、植物体内酶活性及生物钟调控的影响。研究结果表明，CfCIN

基因的过表达可以显著提高植物的光合效率和生物钟的准确性，而其沉

默则导致光合作用能力下降及生物钟的错乱。

1.引言

光合作用是植物生长发育的重要过程，通过该过程，植物能够将阳

光转化为化学能，为自身的生长提供能量和有机物质。植物的光合作用

不仅受到外界环境因素的影响，同时也受到内源基因的调控。近年来，

越来越多的研究发现，生物钟基因在植物的光合作用和生物节律调控中

起着重要的作用。

2.材料与方法

2.1实验材料

本实验使用蕙兰（Cymbidiumgoeringii）作为研究材料，通过PCR

技术扩增蕙兰基因组中的CfCIN基因。同时，以拟南芥（Arabidopsis

thaliana）为外源表达系统，构建了CfCIN基因的过表达和沉默载体。

2.2构建表达载体与转基因植物的获得

通过将CfCIN基因克隆到适当的启动子和终止子之间，构建了

CfCIN基因的过表达载体。将构建好的载体通过农杆菌介导法转化到拟南

芥中，经过筛选获得了CfCIN基因过表达的转基因植物。

2.3生理生化试验和表型分析

利用过表达和沉默CfCIN基因的转基因植物进行一系列的生理生化

试验和表型分析。包括测定植物的光合速率、叶绿素含量、气孔导度、

叶脉细胞的酶活性和生物钟的准确性等。

3.结果与讨论

通过PCR技术成功扩增了CfCIN基因的全长序列，并验证了转基因

植物的获得。生理生化试验和表型分析结果表明，CfCIN基因的过表达可

以显著提高植物的光合速率和光合效率，同时也提高了植物体内酶活性

的水平。此外，过表达CfCIN基因的转基因植物表现出了更加准确的生

物钟调控能力。相反，CfCIN基因的沉默导致植物的光合速率下降、光合

效率降低，并且生物钟的准确性受到影响。

4.结论

本研究通过基因克隆和功能分析揭示了蕙兰CfCIN基因在植物生长

发育中的重要作用。我们发现CfCIN基因过表达可以提高植物的光合作

用能力和生物钟的准确性，而其沉默则导致光合能力下降及生物钟的错

乱。这些结果为深入研究植物光合作用和生物节律调控机制提供了新的

线索，也为植物育种和遗传改良提供了理论依据。