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寒地野生大豆资源疫霉根腐病抗性鉴定技术规程
1范围
本文件规定了寒地野生大豆资源疫霉根腐病抗性鉴定的术语和定义、育苗、菌种来源和保存、接种体制备、接种时间、接种方法、接种后管理、调查时间、调查标准、病情调察、感病率计算及抗性评价。
本文件适用于寒地野生大豆资源疫霉根腐病抗性鉴定。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
NY/T2114-2012大豆疫霉病菌检疫检测与测定方法
DB22/T2805.1-2017大豆主要病虫害抗性鉴定技术规范第1部分：抗疫霉根腐病DB23/T2026-2017寒地野生大豆资源性状描述规范
3术语和定义
DB22/T2805.1和DB23/T2026界定的术语和定义适用于本文件。
4育苗
将野生大豆种子破皮后播种于装有灭菌蛭石的花盆中，每盆中分别种植10粒种子。出苗后每盆留有生长一致的幼苗5株，设置感抗对照品种，3次重复，每个重复种植5盆，育苗期温度控制在20℃~30℃。
5菌种来源和保存
选用当地采集并分离鉴定后的病原菌，或者实验室内保存的有代表性的菌株，采集、分离、鉴定和保存的方法应符合NY/T2114的规定。
6接种体制备
将分离纯化的大豆疫霉菌接种于胡萝卜琼脂培养基，于25℃恒温暗培养7d备用。胡萝卜琼脂培养基的配制应符合NY/T2114的规定。
7接种时间
当第一片三出复叶完全展开后，准备接种。
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8接种方法
将待鉴定幼苗的第一片三出复叶剪下并去掉叶柄，置于不锈钢托盘内，托盘内事先放置无菌纱布并喷施适量蒸馏水保持纱布湿润。用灭菌后的刀片在叶片上表面中心位置划出0.5cm长的伤口。将培养好的接种体切取小于1/2叶片大小的圆形菌块，放置伤口上，菌丝面向上。
9接种后管理
用保鲜膜覆盖托盘，保持温度24℃、光照12h/d、相对湿度100%。
10调查时间
接种后第5天，当对照品种分别表现为感病和抗病，可对接种叶片进行病情表型观察。
11调查标准
叶片变黄、变褐或失绿视为感病。
12病情调查
按调查标准统计感病叶片数。
13感病率计算
感病率计算按下列公式计算。
感病率=×100%
14抗性评价
根据供试材料的感病率确定其对大豆疫霉根腐病的抗性水平，评价标准如表1：
表1供试材料对大豆疫霉根腐病的抗性评价标准
抗感反应Reaction
鉴定标准
standardofidentification
感病率（%）
susceptiblerate
抗（R）
叶片变黄、变褐或失绿
30
中间型（I）
30-70
感病（S）
70
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