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肌酸激酶MB型同功酶质量测定SOP_MMB临床意义_检验科生化项目SOP--第1页
文件编号:
肌酸激酶同功酶质量测定版本号:
页码:第页共页
1检测原理
MMB方法是基于“三明治”原理的一步式酶免疫分析法。样本是利用带有具体针对CKB亚基的单
克隆抗体涂层的二氧化铬粒子以及轭合物试剂(标有β-吡喃半乳糖苷的具体针对CKMB同功酶的单克
隆抗体)孵育的标本与包被CKB亚基特异的单克隆抗体的二氧化铬颗粒及结合物(被CKMB同功酶特
异的单克隆抗体标记的β半乳糖苷酶)一起孵育。在孵育过程中会形成一个由颗粒/CKMB/结合物组成
的三明治式的结构,没有结合的结合物可通过磁性分离和清洗来清除,结合了三明治的β-吡喃半乳糖
苷与一个发色底物氯酚红-β-d-吡喃半乳糖苷(CPRG)结合,CPRG水解释放色基(CPR)。患者样本
中所呈现的CKMB的浓度直接与由于在577nm处测量的CPR的形成而导致的颜色变化的比率成比例。
CKMB+CrO-Ab+CrO-Ab-CKMB-F(ab′)-β-gal+CrO-Ab
2222
F(ab′)-β-吡喃半乳糖苷+F(ab′)-β-吡喃半乳糖苷
22
CrO-Ab-CKMB-F(ab′)-β-gal+清洗液CrO-Ab-CKMB-F(ab′)-β-gal+CrO-Ab
22222
CrO-Ab+F(ab′)-β-吡喃半乳糖苷(转移到比色杯)
22
CPRG(在577nm处不吸收)CrO-Ab-CKMB-F(ab′)-β-galCPR(在577nm处吸收)
22
2标本采集与处理
2.1采血方法
空腹不抗凝静脉血2~3ml。
2.2标本保存
室温保存,及时送检和检测。样本在室温下可存储12小时,在4℃下可存储3天,在–20℃下冷
冻保存1个月。
2.3注意事项
推荐选用血清。标本应避免乳糜、溶血、黄疸。
3试剂和设备
3.1试剂
采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。
3.1.1试剂组成
试剂船1~2孔为结合物,液体;3~4孔为抗体-CrO0.9mg/ml,片剂;5~6孔为CPRG15.7mM,
2
片剂;7孔为底物稀释液缓冲液175mM,液体;8孔为铬稀释缓冲液200mM,液体。
3.1.2试剂准备
肌酸激酶MB型同功酶质量测定SOP_MMB临床意义_检验科生化项目SOP--第1页
肌酸激酶MB型同功酶
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