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·1524·分子诊断与治疗杂志2023年9月第15卷第9期JMolDiagnTher,September2023,Vol.15No.9

•论著•

STAT3调控炎症因子分泌抑制脑梗死细胞凋亡机制

研究

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贾丹丹陈蓉马琳李其富

［摘要］目的初步探讨信号转导和转录活化因子3（STAT3）在脑梗死细胞凋亡相关机制中

的作用。方法首先，构建小鼠脑梗死（MCAO）和大鼠神经元细胞培养和氧⁃葡萄糖剥夺（OGD）模

型，采用实时荧光定量PCR（qPCR）和蛋白免疫印迹（WB）检测脑组织中STAT3mRNA和蛋白表达。

然后，C57BL/6小鼠注射AAV9⁃sh⁃STAT3腺相关病毒3周后构建抑制STAT3表达的MCAO模型，采

用qPCR检测STAT3mRNA表达，采用WB检测凋亡相关蛋白Bcl⁃2相关X蛋白（Bax）和B淋巴细胞

瘤⁃2（Bcl2）表达，采用Tunle染色检测细胞凋亡情况。接着，小鼠神经元细胞转染Sh⁃STAT3和

OE⁃STAT3慢病毒，构建抑制和过表达STAT3模型，采用qPCR和WB检测NLRP3mRNA和蛋白表

达。小鼠注射AAV9⁃sh⁃STAT3和AAV9⁃OE⁃NLRP3腺相关病毒，构建抑制STAT3和过表达NLRP3的

MCAO模型，采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测小鼠血清白细胞介素⁃1β（IL⁃1β）、肿瘤坏死因

子α（TNF⁃α）、白细胞介素⁃10（IL⁃10）、转化生长因子⁃β（TGF⁃β）的表达。此外，大鼠神经元细胞转

染Sh⁃STAT3和OE⁃NLRP3慢病毒48h后构建抑制STAT3表达和过表达NLRP3的OGD模型，采用

WB检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl2表达，采用Tunle染色检测细胞凋亡情况。结果qPCR和WB检

测结果显示，STAT3在MCAO和OGD的脑神经元细胞中表达升高（P0.05）。WB和Tunel染色结果

显示，小鼠脑组织敲低STAT3，MCAO导致的细胞凋亡受到抑制（P0.05）。此外，STAT3通过调控

NLRP3抑制IL⁃1β、TNF⁃α、IL⁃10和TGF⁃β表达（P0.05），过表达NLRP3可降低STAT3对MCAO小

鼠细胞凋亡的保护效果（P0.05）。结论STAT3可通过调控NLRP3炎症小体介导的炎症因子分泌

抑制脑梗死小鼠细胞凋亡。

［关键词］STAT3；NLRP3炎症小体；炎症因子分泌；脑梗死

STAT3inhibitscerebralinfarctionbyregulatinginflammatorycytokinesecretion

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JIADandan，CHENRong，MALin，LIQifu

（DepartmentofNeurology，theFirstAffiliatedHospitalofHainanMedicalUniversity，Haikou，Hainan，

China，570102）

［ABSTRACT］ObjectiveTopreliminaryexploretheroleofsignaltransducerandactivatorof

transcription3（STAT3）intheapoptoticmechanismofcerebralischemia.MethodsFirstly，mousemiddle

cerebralarteryocclusion（MCAO）andratneuronalcellculturewithoxygen⁃glucosedeprivation（OGD）

modelswereestablished.Real⁃timequantitativePCR（qPCR）andWesternblot（WB）wereusedtodetectthe

expressionofSTAT3mRNAandproteininbraintissues.Subsequently，C57BL/6micewereinjectedwithAAV9⁃

sh⁃STAT3adenovirusafter3weeks，anMCAOmodelwithinhibitedSTAT3expressionwasconstructed.qPCR

wasperformedtodetectSTAT3mRNAexpression，whileWBwasusedtoassess