高中生物微专题-选必三知识填空-第1章 第2节 微生物的基本培养技术及应用.docx

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第一章发酵工程

第二节微生物的基本培养技术及应用

一、微生物的基本培养技术

1．微生物的定义：

肉眼难以看清，需要借助光学显微镜或电子显微镜才能观察到的的总称。

2．微生物菌落：

分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成的、有的，这就是菌落。由形成的纯培养物就是一个；一个单菌落就是一个种群。

3．培养基的配制

概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。

(1)培养基作用：或。

(2)培养基类型：

按物理状态可分为和。

按功能可分为和。

(3)成分：各种培养基一般都含有和，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

4．无菌技术

(1)关键：。

(2)无菌技术工作两个方面：

①对操作的、操作者的和进行和。

②对用于微生物培养的、和等进行。

(3)无菌技术主要包括消毒和灭菌

项目

理化因素的作用强度

能否消灭芽孢和孢子

常用方法

消毒

较为温和

不能

灭菌

强烈

能

5．微生物的纯培养

(1)培养物：在微生物学中，将接种于内，在下形成的称为培养物。

(2)纯培养物：由繁殖所获得的称为纯培养物。一般是由单个微生物繁殖形成的。

(3)纯培养：就是纯培养。微生物纯培养步骤：配制培养基—灭菌—接种—分离—培养。

6．探究·实践：酵母菌的纯培养

(1)原理：

采用和将微生物在上，之后得到的一般是由单个微生物形成的。

(2)步骤

①制备培养基：配制培养基—灭菌—倒平板

②接种和分离酵母菌：通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经过数次划线后培养可以分离得到。

③培养酵母菌：完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板（一般做三组，重复实验）和一个未接种的平板倒置，放入℃左右（培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异）的恒温培养箱中培养。

④实验注意事项

A.培养基灭菌后为什么要冷却到50℃左右时开始倒平板？。

B.为什么倒平板和接种整个过程要在酒精灯火焰旁进行？。

C.倒平板时为什么要使锥形瓶的瓶口通过火焰？。

D.在倒平板的过程中，若不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？。

E.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？。

F.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？。

二、微生物的选择培养基与计数

7．选择培养基：在微生物学中，的微生物生长，同时微生物生长的培养基。

8．微生物的选择培养：

(1)方法：；

(2)方法概述：由于土壤细菌的数量庞大，要想得到特定微生物的纯培养物，必须要对土壤进行，然后再将菌液到制备好的上；两个基本操作：和。

(3)操作流程：土壤取样→→取样接种→→菌种鉴定

9．微生物的数量测定

间接计数法（稀释涂布平板法）

直接计数法（显微计数法）

原理

当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌

利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量

公式

每克样品中的菌落数＝；C：某稀释度下平板上生长的平均菌落数；V：涂布平板时所用的稀释液的体积（mL）；M：稀释倍数

每毫升原液所含细菌数：

缺点

当两个或多个菌体连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落

不能区分细胞死活

结果

比实际值偏

比实际值偏

10．探究·实践：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

(1)原理：分解尿素的细菌合成的将尿素分解为，使培养基的碱性。

(2)方法：在以为唯一氮源的培养基中加入指示剂，培养某种细菌，若指示剂变，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。

11．两种纯培养方法对比

比较项目

平板划线法

稀释涂布平板法

关键操作

接种环在固体培养基表面连续划线

①一系列的②涂布平板操作

注意事项

均需灼烧接种环

稀释度要足够高，为确保实验成功可以增加稀释度的范围

菌体获取

在具有显著的菌落特征的区域挑取菌体

从适宜稀释度的平板上的菌落中挑取菌体

适用范围

适用于

适用于和兼性厌氧菌

优点

可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细