《植物生物技术》实验三：植物原生质体的分离、纯化与检测.pdfVIP

一、实验目的

了解植物原生质体分离和纯化的原理，掌握植物原生质体分离、纯化和培养的方法，掌

握原生质体活测定和原生质体计数的方法。

二、实验原理

植物原生质体是指细胞中去掉了细胞壁后的部分，包括原生质膜、细胞质、细胞核等结

构。植物细胞在纤维素酶，半纤维素酶和果胶酶的作用下，细胞壁被消化，纤维素酶的作用

是降解构成细胞壁的纤维素，果胶酶是用来降解连接细胞的中胶层，使细胞丛组织中解离

出来，可以得到裸露的原生质体。原生质体在合适的培养条件下，能再生细胞壁，进行分裂、

生长、形成愈伤组织。进一步分化成根和芽，长成新的植株，表现了植物细胞的全能性。培养

的原生质体在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行原生质体计数。计数

结果以每毫升原生质体数表示。

三、实验材料

棉花YZ1胚性愈伤组织，拟南芥叶片

四、器材与试剂

（）实验器材：培养室，超净工作台，真空泵，高压灭菌锅，离心机，离心管

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（和）过滤器，三角瓶，血球计数板，支吸管，吸管橡皮头，

10ml1.5ml250ml