四川蒙顶山苏云金芽胞杆菌cry基因鉴定及其新型模式cry基因的克隆与表达的开题报告.pdfVIP

四川蒙顶山苏云金芽胞杆菌cry基因鉴定及其新型模

式cry基因的克隆与表达的开题报告

开题报告

一、选题的背景和意义

苏云金芽胞杆菌(Bacillusthuringiensis,简称Bt)是一种广泛分布于

然界的土壤细菌，它具有显著的生物防治潜力。Bt可通过分泌毒素来杀

死害虫，因此被广泛应用于生物农药和基因工程作物的研究中。其中，Bt

的cry基因编码的晶体蛋白毒素对害虫具有杀伤作用。

蒙顶山是我国四川省的一座山峰，曾经从该地方分离出一个Bt菌株。

该菌株的毒力逐渐适应了当地环境的条件，发展出一种新型cry基因，并

表现出较强的生物杀虫活性。因此，对于这一新型cry基因的鉴定和研究，

具有非常重要的意义。同时，其研究结果也可为我国的生物农药和基因

工程作物领域提供有效引导。

二、研究内容和方法

1.研究内容

（1）对蒙顶山Bt菌株进行cry基因鉴定；

（2）克隆蒙顶山Bt菌株新型cry基因；

（3）表达新型cry基因并分析其生物活性。

2.研究方法

（1）PCR扩增和序列分析：采用Bt通用引物对蒙顶山Bt菌株进行

PCR扩增，随后对PCR产物进行回收、测序和比对。

（2）克隆cry基因：对PCR扩增后的cry基因进行克隆，随后完成

构建载体，并通过质粒转化的方式将克隆出的基因导入到E.coli菌株中。

（3）heterologousexpression：通过克隆后的cry基因进行invitro

表达，并对其产物进行进一步的生物活性检测。

三、研究进度计划

1.第1-2周：进行相关文献资料的搜索和整理，初步设计实验方案。

2.第3-4周：对蒙顶山Bt菌株进行cry基因的鉴定工作。

3.第5-6周：克隆cry基因，完成关键技术的优化工作。

4.第7-8周：构建cry基因载体，并完成E.coli质粒的转化。

5.第9-10周：进行新型cry基因的invitro表达。

6.第11-12周：对表达后的cry基因产品进行生物活性检测，并对

实验数据进行分析。

四、预期结果及意义

通过对蒙顶山Bt菌株的cry基因鉴定和新型cry基因的克隆表达，

可以获得一种更有杀虫活性的Bt菌株。同时，对于生物农药和基因工程

作物领域的研究，也具有重要的意义。预期结果是能够克隆并表达出新

型cry基因，并证明克隆的基因具有高杀虫活性。这一结果可以提供一种

新型的生物杀虫剂，并为我国的生物学杀虫剂和基因工程研究提供有效

的引导和参考。