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GCHSAP-无菌室沉降菌检测规程--第1页

无菌室沉降菌测试标准操作规程

1目的：建立无菌室中沉降菌的测试标准操作规程，保证产品在规定洁净级别内

进行检测。

2范围：无菌室的沉降菌的监测。

3依据：国家标准GB/T16294-2010《医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》

GB/T16292-2010《医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法》

4职责：质检员、微生物检验人员对本制度的实施负责。

5内容

5.1测试方法

5.1.1方法概述：本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的

生物粒子于培养基平皿，经48小时以上培养，在适宜的条件下让其繁殖

到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活

微生物数，并以此来评定洁净室的洁净度。

5.1.2所用的仪器和设备

5.1.2.1电热压力蒸汽消毒器：使用时按《电热压力蒸汽消毒器操作规程》进行

操作。

5.1.2.2恒温培养箱：必须定期对培养箱的温度计进行检定。

5.1.2.3直径90mm培养皿：使用前将培养皿置于121℃湿热灭菌30分钟或180℃

干热灭菌2小时。

5.1.2.4培养基：大豆酪蛋白琼脂培养基。将培养基灭菌，冷却至约60℃以下在

无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。待培养基凝固后，

将培养基平皿放入30～35℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿

上确无菌落生长，即可供采样用。

5.1.3测试步骤

5.1.3.1采样方法：将已制备好的培养皿放置在预先确定的取样点，打开培养皿

盖，使培养基表面暴露30分钟，再将培养皿盖上盖后倒置。

5.1.3.2培养：全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。在30～35℃

培养箱中培养，时间不少于48小时。每批培养基应有对照试验，检查培

养基本身是否污染，可每批选定3只培养皿作对照培养。1个平板做搬

运过程中的对照，确保搬运过程中琼脂平板未被污染。

5.1.3.3菌落计数：用肉眼直接计数。若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，

可分辨时仍以2个或2个以上的菌落计数。

5.2注意事项

5.2.1测试用具要作灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。

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5.2.2采取一切措施防止人为对样本的污染。

5.2.3对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。

5.2.4由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面

仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基

沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。

5.2.5采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。

5.3测试规则

5.3.1测试状态

5.3.1.1沉降菌测试前：被测试洁净室（区）的温、湿度须达到规定的要求，静

压差必须控制在规定值内。被测试洁净室（区）已消毒。

5.3.1.2测试状态有静态和动态两种，应在报告中注明测试状态。

5.3.1.3测试人员：测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。静态测试

时，室内测试人员不得多于2个人。

5.3.2测试时间

5.3.2.1对单向流，测试应在净化空调系统