DNA指纹图谱制作思路.pptxVIP

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DNA指纹图谱的制作思路

LyndaMannNovember22,1983July1986DawnAshworth案例分析RichardBurkland

AlecJeffreys莱斯特大学遗传学家DNA指纹图谱(DNAfingerprinting)采用DNA指纹图谱技术,Jeffreys发现两个案件中的DNA样品来自于同一个人,但均与RichardBurkland不相匹配RichardBurkland被无罪释放,并且成为了第一位根据DNA指纹图谱证据而证明无罪之人

寻找真相警方搜集了当地五千余名男子的血液样品,进行DNA筛查历时六个月的时间,没有一个样品与凶手的DNA样品相匹配一位当地的男性IanKelly在酒吧中喝酒时透露,他顶替了自己的朋友提供了一份血样

ColinPitchfork1987年9月19日,ColinPitchfork被捕抽取ColinPitchfork的DNA样品进行比对ColinPitchfork被判终身监禁该按成为历史上首个采用DNA指纹图谱作为证据对当事罪犯进行指控的案例ColinPitchfork

真凶密码

DNA指纹图谱DNA指纹图谱:利用相应的DNA探针与多态性位点杂交所获得的一种DNA图谱。特征:DNA指纹图谱具有高度的个体特异性在家族中具有稳定的遗传性在生物个体水平上的体细胞直接具有稳定性

DNA指纹图谱的应用法医学分析DNA亲子鉴定寻找失散儿童器官移植的配型试验空难事故受难者残骸鉴定人种、性别鉴定肿瘤细胞DNA指纹被盗杀的动物进行鉴定…

个体基因组差异人与人的基因组DNA序列大部分是相同的大约有0.1%的区域存在高度的变异

个体基因组差异

DNA多态性标志第一代DNA多态性标志:限制性片段长度多态性(RFLPs)、随机引物扩增多态性(RAPD)、扩增片段长度多态性(AFLP)第二代DNA多态性标志:可变数目串联重复序列(VNTRs;又称小卫星)、短串联重复序列(STRs;又称微卫星)、线粒体DNA(mtDNA)、Y染色体(Y-STR)第三代DNA多态性标志:单核苷酸多态性(SNP)

DNA指纹图谱制作基本步骤检材样品DNA提取及DNA片段扩增(PCR)限制性核酸内切酶酶切反应电泳分离片段转印Southern杂交放射性自显影

1.检材样品DNA提取及DNA片段扩增(PCR)DNA提取、纯化聚合酶链式反应(PCR)

2.限制性核酸内切酶酶切限制性内切酶(RestrictionEndonucleases)

限制性内切酶识别位点Sau3A限制性内切酶识别位点-CATCCGATCAATGAATGAATGAATGGATCACATCCA--CCGATCAATGAATGAATGAATGAATGAATGGATCAT-1243124356Sau3ASau3ASau3ASau3A5’-GATC-3’3’-CTAG-5’

3.琼脂糖凝胶电泳分离片段

琼脂糖凝胶电泳技术(Gel)

4.转印

5.Southern杂交RadioactiveprobeinsolutionbindstoDNARevealingapatternofbandsX-rayfilm

DNA提取、酶切电泳转膜探针杂交放射性自显影DNA指纹图谱制作过程yndaMannDawnAshworthColinPitchforkRichardBurkland

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