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单克隆抗体制备操作方法及注意事项JEN--第1页

无菌室清洁要求：1、进入无菌间，须更换白大褂，口罩、鞋套必须戴上，

最好戴上帽子、手套；

2、进去后用酒精棉球擦洗手；

3、生物安全柜常用酒精棉球擦洗，擦后棉球不显黑；柜内垃圾当日及时清理；

柜内所有实验操作应在酒精灯前进行；经常紫外杀菌；

4、无菌间物件传递，经窗口紫外照射方可；

5、有关试剂使用后及时用封口膜封住；

6、细胞培养盖子旋松，以便二氧化碳气体进入；拿瓶、加液体均需注意瓶口，

避免污染瓶盖；

7、出门后需要用钥匙锁上；

8、整个无菌间两周清洁一次；

免疫动物选择与瘤细胞同一品系的动物做为免疫对象，现在常用的是Balbc/c

：

小鼠，6-8周龄，一种抗原一次性注射2-3只小鼠，小鼠不宜过大，雌性相对较

好；

首次注射抗原100微克与等体积弗氏完全佐剂混匀，在背部两侧皮下与腹腔分别

注射，形成几个小泡；

间隔两周左右时间（14天）

二次免疫注射抗