《铁皮石斛干细胞室内培育生产技术规程（征求意见稿）》.docx

江苏省市场监督管理局发布I

ICS65.020.20

B31DB32—2022

江苏省地方标准

DB32/T××××—2022

铁皮石斛干细胞室内培育生产技术规程

TechnicalregulationoftheindoorcultivationofstemcellsfromDendrobiumoficinale

（送审稿）

2022-00-00发布2022-00-00实施

I

DB32/T××××—2022

目次

目次 I

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

3.1铁皮石斛干细胞室内培育 1

4生产条件 1

5种源干细胞获取、筛选与增殖 1

5.1培养基配制 1

5.2种源干细胞获取 1

5.3种源干细胞筛选纯化 2

5.4种源干细胞增殖 2

6培育生产 2

6.1培养基配制 2

6.2培育操作 2

7规模化生产 2

8日常管理 2

9采收 2

10质量等级划分 3

11包装、运输、储存 3

11.1包装 3

11.2运输 3

11.3贮存 3

II

DB32/T××××—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由江苏省农业科学院提出。

本文件由江苏省园艺标准化委员会归口。

本标准起草单位：江苏省农业科学院，苏州普朗特尔皮肤细胞科技有限公司，西交利物浦大学，苏州珀立科技服务有限公司，思格（苏州）生物科技有限公司，苏州工业园区服务外包职业学院。

本标准起草人：陈小龙、张杰、吴红升、余向阳、宋立晓、周燕群、王牧、任宝永、李毅、覃鸿妮。

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DB32/T××××

铁皮石斛干细胞室内培育生产技术规程

1范围

本标准规定了铁皮石斛干细胞室内培育的术语和定义、生产条件、种源干细胞获取、筛选与增殖、培育生产、规模化生产、日常管理、采收、质量等级划分、包装、运输及贮存。

本标准适用于铁皮石斛干细胞室内培育生产。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期引用文件，仅所注日期版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。

GB5749生活饮用水卫生标准

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1铁皮石斛干细胞室内培育（TheindoorcultivationofstemcellsofDendrobiumofficinale）

从铁皮石斛茎尖部分离体培养植物愈伤组织，经稳定培育，得到铁皮石斛植物干细胞，再通过进一步扩增培育成的稳定迅速增殖铁皮石斛干细胞培育技术。

4生产条件

室内环境为十万级以上洁净度的洁净间。保持室温25oC~28oC。均匀柔和人工光，光照强度为

2000Lux，种源培育与增殖阶段为完全黑暗，种源生产阶段光暗周期8h：16h。空气相对湿度40%~70%。生产用水和过滤水应分别符合GB5749和GB/T6682的规定。

5种源干细胞获取、筛选与增殖

5.1培养基配制

采用1/2MS培养基+2mg/LNAA+0.5mg/L6-BA+20g/L蔗糖+7.5g/L琼脂固体培养基进行种源干细胞诱导固体培养。采用1/2MS培养基+1mg/L6-BA+20g/L蔗糖+7.5g/L琼脂固体培养基进行种源干细胞增殖固体培养。

5.2种源干细胞获取

将成熟铁皮石斛茎尖组织从茎段上分离后，切成细小的组织块，加入固体培养基中培养，在完全

2

DB32/T××××—2022黑暗条件下培养2周~4周，获得愈伤组织细胞。在相同固体培养基和培养条件下增殖愈伤组织细胞。

5.3种源干细胞筛选纯化

愈伤组织细胞增殖后，每10d将死亡的、褐化和玻璃化的愈伤组织清理出培养体系，筛选留存淡黄色或浅绿色、生长茁壮、均一的种源干细胞进一步培育。

5.4种源干细