细胞外囊泡分离技术2024课件 .pdf

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细胞外囊泡分离技术

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常用细胞外囊泡分离技术

超速禺心法的应用

超速离心法的基本原

超速离心法利用EV与其他杂质颗粒沉降

系数的差异实现分离。

超速离心法的操作步骤超速离心法的应用领域

超速离心法最常用的模式是差速离心,通超速离心法需要专业设备且对操作人员的

过多步不同离心力/转速的离心操作将样专业要求较高,但当样本类型为血浆、血

品内各种颗粒依序分离。清等体液时,其分离的EV纯度较高。

尺寸排阻层析法的特点

SEC的分离原

sec是根据固定相填料孔隙的大小与样品中颗粒的斯托克斯半径(即分子在溶液中的表观尺寸)

间相对关系将不同粒径的颗粒分不同组份洗出的一种色谱学方法。

SEC的分离过程

当不同尺寸的颗粒流经SEC柱时,EV等粒径大于填料孔隙的颗粒被排除在凝胶颗粒以外,路径

较短;而蛋白质等小于孔隙的颗粒则进入其内部,路径较长,这使二者显示出不同的分配系数

,进而可在不同保留时间被洗脱流出。

■SEC的应用范围

近位SEC分离样品体积可调,广泛适用于不同类型的EV样品。在使用SEC方法时,应根据样品的性质

选择分离柱、填充物类型,收集合适组份的洗脱液进行下游应用。

亲和富集法的优势

免疫亲和捕获法的优势

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