黑果枸杞及其制品中总花色苷含量的快速测定 pH示差法.docVIP

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青海省标准化协会发布2021年XX月XX日实施2021年XX月XX日发布黑果枸杞及其制品中总花色苷含量的快速测定pH示差法T/QASXXX-2021T/QAS团体标准ICS67.050

青海省标准化协会发布

2021年XX月XX日实施

2021年XX月XX日发布

黑果枸杞及其制品中总花色苷含量的快速测定pH示差法

T/QASXXX-2021

T/QAS

团体标准

CCSX04

（征求意见稿）

T/QASXXX-2021

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由青海省标准化协会提出并归口。

本文件起草单位：中国科学院西北高原生物研究所。

本文件主要起草人：谭亮、李玉林、陈涛、杲秀珍、王环、马家麟、赵静、冀恬。

本文件由青海省标准化协会监督实施。

黑果枸杞及其制品中总花色苷含量的快速测定pH示差法

范围

本文件规定了黑果枸杞及其制品中总花色苷含量的快速测定——pH示差法的术语、定义、原理、试剂、材料、仪器、设备、分析步骤、结果计算、结果表示和精密度。

本文件适用于黑果枸杞及其制品（包括保健食品和食品，如黑果枸杞提取物、黑果枸杞片、黑果枸杞胶囊、黑果枸杞口服液、黑果枸杞颗粒冲剂等；饮料类，如黑果枸杞饮料、黑果枸杞酒等）中含量大于8.55mg/100g总花色苷的测定。

其他植物源性食品（如紫皮茄子、紫薯、紫洋葱、紫甘蓝、紫白菜、大樱桃、紫葡萄、提子、蓝莓、黑树莓、黑豆、黑藜麦、黑米等）及其制品中总花色苷的测定可参照本文件执行。

规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

术语和定义

3.1

花色苷anthocyanins

是花色素与糖以糖苷键结合而成的具有2-苯基苯并吡喃阳离子结构的类黄酮。

原理

溶液pH不同，花色苷的存在形式也不同。在pH值很低时，其溶液呈现最强的红色（花烊正离子），随着pH值增大，花色苷的颜色将褪至无色（甲醇假碱和查尔酮），最后在高pH值时变成紫色或蓝色（醌式（脱水）碱）。花色苷发色团的结构转换是pH的函数，起干扰作用的褐色降解物的特性不随pH变化。根据朗伯-比耳定律，在两个不同的pH下，花色苷溶液的吸光度差值与花色苷的含量成正比。因此，通过两个pH，同一波长（以花色苷最大可见吸收波长）下的吸光度差值以及在700nm处测得的用于校正略微浑浊供试液的吸光度来求得花色苷含量。

5试剂和材料

5.1试剂

5.1.1氯化钾：分析纯。

5.1.2乙酸钠：分析纯。

5.1.3浓盐酸：分析纯。

5.1.4无水乙醇：分析纯。

5.1.5实验用水：应符合GB/T6682规定的三级水要求。

5.2试剂配制

5.2.1乙醇溶液（80%）的配制

量取无水乙醇800mL于1000mL容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。

5.2.2氯化钾缓冲溶液（0.025mol/L，pH1.0）的配制

称取1.86g氯化钾固体（准确至±0.001g）至2000mL烧杯中，加水约980mL溶解，加入浓盐酸调节溶液pH值至1.0±0.05后，转移至1000mL容量瓶中，混匀，定容。

5.2.3乙酸钠缓冲溶液（0.4mol/L，pH4.5）的配制

称取54.43g乙酸钠固体（准确至±0.001g）至2000mL烧杯中，加水约960mL溶解，加入浓盐酸调节溶液pH值至4.5±0.05后，转移至1000mL容量瓶中，混匀，定容。

6仪器和设备

6.1分析天平：感量为±0.0001g和±0.001g。

6.2分光光度仪：具有1cm比色皿，可在400nm~900nm范围内测量吸光度。

6.3pH计：精度为0.01。

6.4超声波清洗机：频率40KHz，温度20~80℃，时间1~30min。

6.5台式离心机：最大容量56mL，转速4000~16500r/min。

6.6食物粉碎机：可将固体样品粉碎并通过425μm（40目）筛和250μm（60目）筛。

6.7匀浆分散机：处理量1~2000mL（H2O），转速3000~25000r/min。

7分析步骤

7.1试样制备

7.1.1黑果枸杞鲜果制备

用四分法取适量或取全部，用匀浆分散机以15000~20000r/min转速匀浆分散20s制成