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DB32/T4840—2024
5.5接种培养
按NY/T528的规定执行,做好标记。接种后试管置于23℃~25℃下避光培养,待菌丝长满斜面
2/3以上。
6原种
6.1固体原种
6.1.1容器
符合NY/T528的规定,塑料制品符合GB4806.7的规定。
6.1.2培养料
宜使用但不限于以下配方:
a)谷粒98%,碳酸钙2%,含水量60%~62%;
b)木屑78%,麸皮20%,碳酸钙2%,含水量60%~62%。
6.1.3配制灭菌
按NY/T528的规定配制后分装入原种瓶(袋),121℃~123℃灭菌2h。
6.1.4接种培养
料温冷却至26℃以下,按NY/T528的规定接种,做好标记。接种后置于培养室,23℃~25℃遮光
培养,空气相对湿度保持在55%~65%,二氧化碳浓度低于0.5%,当菌丝长满瓶(袋)时结束培养。培养
期间按NY/T528要求定期检查。
6.1.5质量检验
培养完成后对菌种进行质量检验,检查要求应符合附录A的规定。
6.2液体原种
6.2.1摇瓶液体原种
6.2.1.1培养基
马铃薯200g(浸出液)、稻壳100g(浸出液)、葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁0.5g、加水至
1000mL,pH自然。
6.2.1.2配制灭菌
马铃薯和稻壳煮汁过滤后,加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁,加水至1000mL搅拌均匀,装入摇瓶,
装液量不超过摇瓶容量的2/5。装好的摇瓶放入高压灭菌锅内灭菌,121℃下灭菌30min。
6.2.1.3接种培养
培养基温度降至26℃以下,严格按照无菌操作程序,将母种块切割成3mm~5mm颗粒,接入待接
种摇瓶培养基内,每100mL液体培养基接种10粒。接种后在25℃环境下静置培养2d,待接入的菌种
块萌发出白色菌丝体后,置于振荡培养箱,25℃下150r/min振荡培养5d~7d。
2
DB32/T4840—2024
6.2.1.4质量检验
培养完成后对菌种进行质量检验,检验要求应符合附录B的规定。
6.2.2发酵罐液体原种
6.2.2.1培养基
参考配方:按照每1000mL水加入玉米粉7.5g、黄豆粉5g、葡萄糖20g、蛋白胨2g、磷酸二氢钾
1g、硫酸镁0.5g比例配制。
6.2.2.2配制灭菌
原料搅拌均匀,不应有结块,转入发酵罐内,装液量不超过罐体容量的70%,加入0.03%消泡剂。
121℃灭菌90min。生产用水应符合GB5749的规定。
6.2.2.3接种培养
培养基温度降至26℃以下,维持罐体压力在0.03MPa,快速接入摇瓶菌种。接种量为罐内培养基
总体积的0.1%~0.2%。维持罐体压力在0.03MPa,温度25℃,搅拌状态下培养7d~10d。
6.2.2.4质量检验
培养完成后对菌种进行质量检验,检验要求应符合附录B的规定。
7栽培种
7.1容器
应符合NY/T528的规定。宜使用17cm×35cm×0.005cm规格的聚丙烯塑料袋,塑料制品符合
GB4806.7的规定。
7.2培养料
宜使用但不限于以下配方:
a)杂木屑43%,稻壳30%,玉米芯20%,麸皮或米糠5%,石膏1%,石灰1%,含水量63%~65%;
b)杂木屑76%,稻壳20%,黄豆粉2%,石灰1%,石膏1%,含水量63%~65%。
7.3配制灭菌
按NY/T528的规定配制后分装入菌种袋,121℃~123℃灭菌2h。
7.4接种培养
灭菌结束后在冷却室冷却至25℃以下。固体原种接种按NY/T528的规定执行。发酵罐液体原种
用液体菌种接种器接种,每
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