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中国畜牧兽医,():
20245151807-1818
ChinaAnimalHusbandrVeterinarMedicine
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水牛SFRP1基因序列分析真核表达
载体构建及组织表达分析
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黄丽清段安琴郑海英杨春艳尚江华
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广西水牛研究所广西水牛遗传繁育重点实验室南宁农业农村部水牛遗传繁育技术重点实验室南宁
1.5300012.530001
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摘要目的获取水牛分泌型卷曲相关蛋白基因区序列并预测其编码蛋白的结构功能构建
1SFRP1CDS
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SFRP1基因真核表达载体检测SFRP1基因在水牛不同组织中的表达情况为探索SFRP1基因在水牛生长发育
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中的作用奠定基础方法以水牛卵巢组织为模板通过对基因区序列进行扩增并
cDNART-PCRSFRP1CDS
,,
测序利用生物信息学在线分析软件对水牛SFRP1基因与不同物种进行比对和系统进化树构建并预测SFRP1
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蛋白理化性质信号肽跨膜结构等将获得的目的基因连接至CMV-HAhPBase-mcheer载体并转染至水牛颗
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粒细胞检测转染后荧光和基因表达情况通过实时荧光定量PCR检测水牛不同组织中SFRP1基因表达情况
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结果水牛SFRP1基因CDS区长927bp共编码308个氨基酸多重序列比对结果显示水牛SFRP1基因氨基
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酸序列与黄牛牦牛山羊虎鲸黑猩猩北极狐猫人小鼠的相似性分别为100%100%99.65%98.58%
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存在和结构域水牛
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