性病实验室检测的技术标准和操作规程.pdf

生殖医学中心

性病实验室检测操作规程

参照标准：1、乌鲁木齐市性病医疗机构规范化管理资料汇编，2002.11.07，38

2、试剂相关说明书

目录

一、淋病检查的实验室技术

(一)分泌物涂片检查

（二）淋球菌的分离培养

（三）淋球菌的保存

（四）氧化酶试验

二、支原体的检测

三、衣原体检查.

四、梅毒的实验室检测

(一)直接镜检.

（二）非特异性梅毒螺旋体试验.

五、TPHA梅毒螺旋体血凝试验

一、淋病检查的实验室技术

(一)分泌物涂片检查

急性淋菌性尿道炎患者常有大量脓性分泌物。在有些脓细胞内可见革兰氏染色呈阴性的双球菌，

椭圆或球形，常成双排列。因形态特殊，可取患者尿道分泌物制成涂片后染色，检查有无典型细胞内

革兰阴性双球菌，可作为初步诊断的依据。

标本采集

尿道分泌物、宫颈粘液、尿的离心沉淀物。

涂片镜检

涂片后，待自然干燥后，加热固定，行革兰染色，油镜观察。

结果

在急性患者的尿道脓性分泌物革兰染色涂片中，常可见到大量红色多形核白细胞，有些细胞中吞

噬有淋球菌。多数多形核白细胞中并不含淋菌，但不少细胞中常含有1对或数对，甚至20~30对。淋

球菌常存在于细胞浆内。

在病期较长或经过治疗的淋病患者的涂片中淋球菌比较少，有时呈单个、四联和八叠状，且常位

于细胞外。

对有些细菌难以下结论时，需进行培养和鉴定。

注意事项

1．涂片时不要用力涂擦，而应将棉拭在玻片上轻轻滚动。涂擦过重，细胞容易破裂变形，致细

菌从胞内溢出。

2．涂片厚薄适宜。过厚，加之染色过程中脱色时间不足，革兰染色易呈紫色。因此，脱色时间

要视涂片厚薄而定。

3．固定涂片时，迅速通过火焰2~3次，避免加热过度使细胞变形。热度以不烫手为宜。

4．不推荐用涂片检查来诊断淋菌的直肠和咽部的感染，也不推荐用来作判愈。

方法评价

涂片检查方法简便、有效、价格低廉且有一定的敏感性和特异性。但其特异性随取材部位的不同

而有所不同。男性尿道取材特异性较高，而从女性子宫颈取材特异性较低。因此，世界卫生组织不推

荐用涂片法来诊断女性患者。

革兰染色

（一）操作步骤

1.细菌涂片须经火焰固定。

2.先用甲液滴加在标本上，加的量以盖住标本为准，再加等的乙液，混匀，染3-5秒钏，用自

来水从玻片的一端冲去染液，甩干。

3.滴加适量碱性碘液在标本上，3-5秒后，自来水冲洗，甩干。

4.丙酮酒精脱色，脱色的标本为：当丙酮酒精滴加在标本上，不出现蓝色或淡紫色为宜。

5.用碱性复红复染，覆盖标本，3-5秒后，自来水冲洗，待其自然干燥或用吸水纸吸干，油镜

观察。

（二）革兰染液

1．碱性结晶紫液甲液结晶紫2.5g

蒸馏水1000ml

结晶紫置于研钵中,加入少量的蒸馏水,并使之溶解,待其完全溶解后,移入所备容器中,并用蒸馏水

将研钵中的染料尽量洗下,补充蒸馏水到1000ml。

乙液：NaHCO12.5g

3

蒸馏水1000ml

2．碱性碘液

碘2g

NaOH（1mol/L）10ml

蒸馏水90ml

先将碘与NaOH置研钵中研磨，使之完全溶解后，加入蒸馏水混合即成。

3．丙酮酒精

95%的酒精75ml，丙酮25ml，将二者混合即成。

4．碱性复红水溶液

饱和石碳酸复红酒精溶液用蒸馏水稀释10倍。

（二）淋球菌的分离培养

如果标本中有淋球菌，则在合适的培养基上经培养后可长成菌落。各种细菌在培养基上生长的菌

落形态各不相同。根据菌落的大小，表面高起或扁平、光泽、色素和边缘的情况等，作为细菌鉴定的

标准。

．方法1

（1）取材

培养要取得成功，取材部位和方法要准确。由男性患者