RARa阴性和阳性细胞对凋亡诱导剂敏感性差异的分子机制研究的开题报告.pdfVIP

PML/RARa阴性和阳性细胞对凋亡诱导剂敏感性差

异的分子机制研究的开题报告

题目：PML/RARa阴性和阳性细胞对凋亡诱导剂敏感性差异的分子

机制研究

一、研究背景与意义

急性早幼粒细胞白血病（APL）是一种特殊类型的白血病，其发病率

不高，但由于其快速进展和治疗难度大，使得其具有重要的临床意义。

APL病人的异常细胞中大多数都含有PML/RARa基因融合所产生的融合

蛋白，这是APL发病的重要分子机制之一。我们已知，APL的治疗方式

中一种比较常用的方法为使用全反式维甲酸（ATRA）和芳香族醛异构酶

抑制剂如阿霉素的联合治疗。但是，这种治疗方法并不能很好地解决所

有APL病人的问题，其中一个原因是PML/RARa阳性细胞对联合化疗的

敏感性比PML/RARa阴性细胞更低。

因此，我们需要进一步了解PML/RARa阴阳性细胞对凋亡诱导剂敏

感性差异的分子机制，从中发掘出新的治疗方法，提高APL病人的治疗

效果。

二、研究内容和方法

本研究将建立PML/RARa阴阳性细胞系，通过比较两种细胞系对凋

亡诱导剂的敏感性差异来探索阴阳性细胞对凋亡诱导剂敏感性差异的分

子机制。

具体步骤如下：

1.构建PML/RARa阴阳性细胞系。

采用pMSCV-Neo-PML/RARa（阳性）和pMSCV-Neo-GFP（阴性）

转染293T细胞株，用获得的病毒颗粒感染HL-60或NB4细胞系，获得

PML/RARa阴阳性细胞系。

2.比较阴阳性细胞对凋亡诱导剂的敏感性差异。

将两种细胞系分别暴露于不同的凋亡诱导剂浓度下，通过细胞周期

分析和AnnexinV/PI双染流式细胞术检测细胞的凋亡率和细胞周期变化

情况。

3.探究阴阳性细胞对凋亡诱导剂敏感性差异的分子机制。

通过Westernblot，Real-TimePCR和ChIP-qPCR等方法来检测细

胞死亡相关蛋白如caspase-3、caspase-9，调控凋亡的信号转导通路如

PI3K/AKT/mTOR和MAPK等的表达水平和相关的组蛋白修饰。

三、预期结果和意义

预期本研究将阐明PML/RARa阴阳性细胞对凋亡诱导剂敏感性差异

的分子机制，为进一步开发针对PML/RARa阳性细胞的新型治疗策略提

供理论依据，并为APL的治疗和其他白血病的治疗提供新思路。