T_HBIQA 0011-2024 中兽药中非法添加药物恩诺沙星快速检测 表面增强拉曼光谱法.docxVIP

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T/HBIQA

河北省检验检疫学会团体标准T/HBIQA0011—2024

中兽药中非法添加药物恩诺沙星快速检测表面增强拉曼光谱法

RapiddetectionofillegallyenrofloxacininChineseveterinarymedicineSurfaceenhancedRamanspectroscopymethod

2024-08-15发布2024-10-15实施

河北省检验检疫学会发布

T/HBIQA0011—2024

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由河北省检验检疫学会提出并归口。

本文件起草单位：石家庄海关技术中心、厦门市普识纳米科技有限公司。

本文件主要起草人：艾连峰、曾勇明、杨欣羽、张若愚、王敬、张海超、李珊。

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中兽药中非法添加药物恩诺沙星快速检测表面增强拉曼光谱法

1范围

本文件规定了中兽药中恩诺沙星的表面增强拉曼光谱快速检测方法。本文件适用于中兽制剂中恩诺沙星成分的快速检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

不同物质具有与其分子结构相对应的特征拉曼光谱。一般样品经稀释，复杂样品经液液萃取，加表面增强试剂对信号增强，进行拉曼光谱扫描。与标准谱图库中的恩诺沙星特征拉曼位移（1080±5cm-1,1215±5cm-1,1245±5cm-1,1280±5cm-1,1349±5cm-1,1350±5cm-1,1399±5cm-1,1500±5cm-1,1629±5cm-1）进行匹配识别，对样品中的恩诺沙星进行定性判定。

5试剂和材料

5.1试剂

除另有规定外，试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1.1甲酸，色谱纯。

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5.1.2甲醇，色谱纯。

5.1.3乙腈，色谱纯。

5.1.4氯化钠。

5.1.5N-丙基乙二胺吸附剂（PSA）。

5.1.6石墨化碳（GCB）。

5.1.7净化管：2mL离心管装有0.12gN-丙基乙二胺固相吸附剂（PSA）+0.05g石墨化碳黑（GCB）。

5.1.8促凝剂：1mol/L的氯化钠，称取氯化钠固体0.585g，加水定容至10mL。

5.1.9甲酸-甲醇溶液：20mL甲醇加入1mL甲酸混合均匀。

5.1.10表面增强试剂：纳米金溶胶或相当者。。

注：表面增强试剂的参考配制方法：纳米金溶胶：取10mL0.2mol/L氯金酸（AuCl3·HCl·4H2O）水溶液加热至沸，

剧烈搅拌下准确加入0.2mL1%抗坏血酸（C6H8O6），金黄色的氯金酸水溶液在1min内变为红色，冷却后加入0.05

mL浓度为1%的柠檬酸三钠（Na3C6H5O7）水溶液，摇匀后备用，现用现配。

5.1.11恩诺沙星标准品：C19H22FN3O3，CAS号：93106-60-6，纯度≥98%。

5.1.12恩诺沙星标准溶液：准确称取标准物质0.1000g，甲醇（HPLC级）准确定容至100mL。保证配

制样本浓度为1mg/mL，于4℃避光保存，有效期1个月。

5.2材料

5.2.1塑料具塞离心管：2mL。

5.2.2移液吸头：10μL，200μL，1000μL。

5.2.3容量瓶：10mL。

6仪器设备

6.1拉曼光谱仪

稳频激光光源：发射波长为785±1nm，线宽0.1nm，能量≥250mW；光谱分辨率≤10cm-1；光谱响应范围300cm-1~2700cm-1，或大于该响应范围。

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6.2移液器：200μL，1000μL。

6.3涡旋振荡器。

6.4离心机：最大转速≥10000r/min。

6.5电子天平：感量为0.01g和0.0001g。

6.6氮吹