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骨骼肌收缩实验
(1);肌肉标本收缩的描记
及单收缩的分析
刺激的强度对骨骼肌收缩的影响;实验的背景知识与实验原理;骨骼肌受到一次短促的阈上刺激时,先是产生一次动作电位,紧接着出现一次机械收缩,称为单收缩。收缩的全过程可分为潜伏期、收缩期和舒张期。在一次单收缩中,肌峰电位的时程(相当于绝对不应期)仅1~2毫秒,而收缩过程可达几十甚至上百毫秒(蛙的腓肠肌可达100毫秒以上)。;;2.张力换能器
换能器是一种能将机械能、化学能、光能等非电量形式的能量转换为电能的器件或装置,并线性相关。利用理化性质和理化效应制成的换能器种类繁多,原理各异。;张力换能器是一种能把非电量的生理参数如力、位移等转换为电阻变化的间接型传感器,属于电阻应变式传感器。通常由弹性元件、电阻应变片和其他附件组成。;弹性元件采用金属弹性悬梁,可根据机械力的大小选用不同厚度的弹性金属。弹性悬梁的厚度不同,张力换能器的量程亦不同。两组应变片R1、R4及R2、R3分别贴于梁的两面。两组应变片中间接一只调零电位器,并用5~6V直流电源供电,组成差动式的惠斯登桥式电路(非平衡式电桥),如图所示。;惠斯登桥式电路;实验时,根据测量方向将换能器用“双凹夹”固定在合适的支架上。但由于双凹夹在支架上移位不方便,很难在小范围内做出精细的移位;移位不当,可能引起标本的损伤和换能器的损坏。;;测量的方向,即力与位移的方向,要与张力换能器弹性悬梁的前端上下移动的方向保持一致(即与横梁成90度)。使能量转换和线性关系良好,符合张力换能器设计与使用上的要求。;张力换能器在使用中要注意:
(1)记录肌肉收缩类实验指标时,张力换能器金属弹性悬梁外露的前端向下移位(下拉),收缩曲线为正立的,即肌收缩时,基线上移,舒张时下移,较为符合一般描记观察的习惯。;一般张力换能器的调零电位器设计为暗调节,为了方便使用,其暗调节孔朝上,故张力换能器有暗调节孔的一面为上。;3.影响骨骼肌收缩效能的因素
肌细胞最本质的功能是将化学能转变为机械功,产生张力和缩短。肌肉收缩效能(performancecontraction)表现为收缩时产生的张力和/或缩短程度(shortening),以及产生张力或缩短的速度(velocity)。
横纹肌的收缩效能由收缩前或收缩时承受的负荷、自身的收缩能力和总和效应等因素决定的。;通过收缩的总和,骨骼肌可快速调节其收缩强度,而心肌则不会发生总和。由于在体的骨骼肌的收缩是受神经控制的,故收缩的总和是在中枢神经系统的调节下完成的。它有两种形式,即运动单位数量的总和与频率效应的总和。;;;实验操作;一、剥制坐骨神经-腓肠肌标本;二、连接装置和仪器设备
;;;;;换能器正面(贴标签面或有平衡暗调节孔的一面)向上。;一维微调器,可将夹持的换能器上下轻微移位。;;;2.刺激强度与反应的关系;极慢扫描速度下,大致相等时间间隔后,给以强度逐渐增加的单刺激(实验模式中的“强度递增刺激”)。直到确定出最适刺激强度后,停止刺激。每一单刺激的方波,波宽不变,调节其电压幅度来改变刺激的强度。;①启动刺激,观察到出现肌肉的最小收缩。测量收缩幅度并记下刺激强度,此时的刺激强度为阈强度。
②按相同间隔逐渐增加刺激强度,观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系。
③当刺激强度达到某一数值后,肌肉收缩幅度不再随刺激增加而升高。记录此时的收缩曲线和刺激强度。;起始刺激强度需要进行调节;强度递增刺激(单刺激)方式:仪器系统以程控方式设置的一种刺激方式,可在点击“开始刺激”后,按基本设置参数自动以强度递增方式发出刺激脉冲。即自动的每刺激一次,强度递增一次。刺激前,需确定初始刺激强度、组间延时,以及各组(次)刺激之间的强度增量。参数确定后,用鼠标单击刺激命令,系统即从初始刺激开始,按强度递增方式发出一组组刺激,各组刺激之间的周期由组间延时参数确定。;
由“默认”改为“偏下”;;;①选定实验项目后,在弹出的刺激器参数设置菜单中,首先将“强度递增刺激”模式改为“单刺激”,刺激波宽设为1ms,并将默认的刺激幅度适当调高。
②点“开始采集”快捷键,查看显示屏上是否出现扫描线,进一步“调零”和调节“扫描速度”。
③在连线扫描的基础上,点“刺激”键,给予标本单刺激,观察标本有无反应,显示屏上是否有收缩波出现。如果标本没有收缩反应,在确定标本活性正常的情况下,这时应一边增强刺激方波的电压(刺激强度),一边再刺激观察,同时要注意,仪器有无正
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