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微生物室室内质量控制操作程序

1目的

指导微生物室工作人员进行室内质量控制，规范所有检测项目的室内质控操作程序，保证检测结果准确可靠，决定常规报告能否正确发出。

2适用范围

适用于微生物室所有检测项目的室内质量控制。

3职责

3.1微生物室技术人员应分别负责微生物室检测标本前、中、后的各项室内质量控制工作，若有失控，应进行相应的分析和失控后处理，并及时填写失控分析报告。同时，做好微生物室试剂、培养基、仪器、接种环和标准菌株等的质控工作。

3.2质量监督员负责对微生物室所有检测项目的室内质控进行指导、监督和分析，并定期汇总、回顾室内质控结果，制订和修改质控计划。

3.3微生物室组长负责协调、监督和检查质量监督员的工作，定期召开组内质量控制会议，总结小组室内质控情况。

4室内质控工作程序

4.1培养基的质控程序

4.1.1配制培养基时，所用原料如各类培养基干粉应在瓶身注明收到日期，开启时应注明开启时间，且严格遵守厂家规定的贮存条件和有效使用期限。配制完后填写《微生物室自制培养基（试剂）配制及质控记录表》。

4.1.2商品化成品培养基要记录购入日期、失效日期，且每批培养基均需由厂家提供质量评估报告并存档，培养基按照厂家说明书规定的条件贮存并在有效期内使用。商品培养基应用相应的质控办法和相应菌株进行质量监测并填写《商品化培养基质控结果记录》。

4.1.3质控频率：每次配制培养基后；每批次或每货次培养基使用前。

4.1.4质控方法：

4.1.4.1培养基外观检查：要求培养基外观良好，光滑、水分适宜，无污染，有适当的颜色和厚度、试管培养基湿度适宜。

4.1.4.2无菌试验：每批随机抽样5%，35℃培养24小时，抽样中每个培养基出现2个以上菌落，视为本批培养基不合格；无菌生长视为合格。

4.1.4.3合格试验：包括生长试验和生长抑制试验。用标准菌株或经准确鉴定的临床分离株，检测培养基的生长情况或生长抑制情况。鉴定培养基随机取两个，用相应阴性和阳性反应（标准菌株或质控菌株或已知菌株）菌株做质控，合格后，记录结果。常用培养基的生长合格试验见表1

表1常用分离培养基已知菌生长试验或生长抑制试验

培养基

质控菌种

生长情况

结果

哥伦比亚血琼脂平板

万古巧克力琼脂

麦康凯琼脂

SS琼脂

沙保罗琼脂

科玛嘉念珠菌显色培养基

碱性蛋白胨水

庆大琼脂平板

MH平板

BMH平板

CMH平板

化脓链球菌

肺炎链球菌

流感嗜血杆菌

金黄色葡萄球菌大肠埃希菌福氏志贺菌

金黄色葡萄球菌

粪肠球菌

产气肠杆菌

鼠伤寒沙门菌

大肠埃希菌

白色念珠菌

白色念珠菌

副溶血弧菌

副溶血弧菌

金黄色葡萄球菌

大肠埃希菌

铜绿假单胞菌

肺炎链球菌

淋球菌

+

+

+

－

+

+

－

－

+

+

－

+

+

+

+

+

+

+

+

+

明显乙型溶血环

甲型溶血环

24h生长

不生长

分解乳糖，菌落红色

不分解乳糖，菌落无色透明

不生长

不生长

粉红色菌落

无色菌落，中心黑色

不生长

24h生长

绿色

绿色

灰色湿润菌落

药敏试验在控

药敏试验在控

药敏试验在控

药敏试验在控

药敏试验在控

HTM平板

铁二糖尿素培养基

蛋白胨水

葡萄糖蛋白胨水

O—F培养基

苯丙氨酸培养基

西蒙氏枸橼酸盐

葡萄糖酸盐试验培养基

动力半固体

流感嗜血杆菌

大肠埃希菌

变形杆菌

大肠埃希菌

肺炎克雷伯菌

大肠埃希菌

产气肠杆菌

大肠埃希菌

铜绿假单胞菌

变形杆菌

大肠埃希菌

产气肠杆菌

大肠埃希菌

肺炎克雷伯菌

大肠埃希菌

大肠埃希菌

铜绿假单胞菌

+药敏试验在控

斜面黄色/上层黄色/下层黄色/有气泡

斜面红色/上层玫瑰红，黑色不定/下层玫瑰红

吲哚阳性

吲哚阴性

甲基红阳性、V-P阴性

甲基红阴性、V-P阳性

发酵葡萄糖、乳糖

氧化分解葡萄糖、乳糖

阳性

阴性

阳性

阴性

阳性

阴性

阳性

阴性

红色

无色

甲基红、V-P试验阳性均为玫红色，橙色为阴性。

全部呈黄色

上层黄色/底层不变色

斜面呈绿色

斜面不变色

浑浊或变色

澄清

黄色或砖红色沉淀

不变色

延穿刺线扩散生长

无扩散生长

4.2常用试剂质控程序

4.2.1常用试剂包括

氧化酶试剂、触酶试剂、凝固酶试剂、革兰氏染液、抗酸染液、β－内酰胺酶纸片、因子纸片。

4.2.2试剂来源

a氧化酶试剂：盐酸二甲基对二苯胺50mg，加入5ml蒸馏水，混匀，4℃保存。

b触酶试剂：30%双氧水1ml加9ml蒸馏水混匀，4℃保存

c凝固酶试剂：EDTA抗凝血浆。

d革兰氏染液、抗酸染液：BASO公司试剂盒。

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