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第十章色谱别离过程
编辑课件
第一节概述
一、色谱法的由来
1.1906年由俄国植物学家Tsweet创立
植物色素别离见图示
40年代TLC,纸色谱
50年代GC出现使色谱具备别离和在线分析功能
60年代末HPLC出现,使色谱分析范围进一步扩大
2.现在:一种重要的别离、分析技术
别离混合物各组分并加以分析
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图示
Ø固定相——CaCO颗粒
3
Ø流动相——石油醚
色带
色带
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二、色谱法定义、实质和目的
二、色谱法定义、实质和目的
Ø定义:利用物质的物理化学性质建立的别离、分析
Ø方法
Ø实质:别离
Ø目的:定性分析或定量分析
其中的一相固定不动,称为固定相;
另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体〔气
体或液体〕,称为流动相。
固定相——除了固体,还可以是液体
流动相——液体或气体
色谱柱——各种材质和尺寸
被别离组分——不再仅局限于有色物质
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当流动相中携带的混合物流经固定相时,其与固定
相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的
差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随
着流动相的移动,混合物在两相间经过反复屡次的分配平
衡,使得各组分被固定相保存的时间不同,从而按一定次
序由固定相中流出。
与适当的柱后检测方法结合,实现混合物中各组分的别
离与检测。
两相及两相的相对运动构成了色谱法的根底
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三.色谱法的特点
〔1〕别离效率高
复杂混合物,有机同系物、异构体。手性异构体。
〔2〕灵敏度高
可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质
量。
〔3〕分析速度快
一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。
〔4〕应用范围广
气相色谱:沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。
液相色谱:高沸点、热不稳定、生物试样的别离分析。
缺乏之处:
被别离组分的定性较为困难。
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第二节色谱别离过程的根本原理
一、别离原理
色谱别离过程的实质是溶质在不互溶的固定
相和流动相之间进行的一种连续屡次的交换过程,
它借助溶质在亮相间分配行为的差异而使不同的
溶质别离。
ü以吸附色谱为例
ü吸附→解吸→再吸附→再解吸→反复屡次洗
脱→被测组分分配系数不同→差速迁移→别离
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n分配系数的微小差异→吸附能力的微小差异
n微小差异积累→较大差异→吸附能力弱的组分先流出;
吸附能力强的组分后流出
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二、固定相〔色谱柱填料〕
1.固体固定相
a常用的固体吸附剂:活性炭,硅胶,氧化铝,分子筛等
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