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色谱条件的选择－讲稿
山东大学
王吉顺
2005.8
编辑课件
色谱条件包括以下内容：
1.仪
器：生产商，型号
2.色谱柱：柱商品名称，填料商品名称，填料类型，
色谱
柱长度〔cm〕和内径〔mm〕，填
料粒经〔um〕
3.流动相：流动相组成和比例，流速〔ml/min〕
4.检测器：型号及参数〔如波长nm〕
5.进样量：体积〔ul〕编辑课件
色谱柱的选择
大多数化合物是可以使用C18柱别离
C18优点：柱廉价，流动相廉价，使用时间
长，易于通过改变流动相得到最正确别
离，
药品本身具有纯度高的特点，容易别离，
辅料和分解产物是别离的难点。
编辑课件
比中药成分的别离，体液中药物成分的别
选择色谱条件的方法
•1．查文献，学习别人的方法
•2．文献中没有的新药和新化合物可以使用结构类似化
合物的色谱条件
•3．自己积累药物分析的色谱条件，从中寻找规律，尤
其是要总结解决问题的方法。把自己积累的方法用于
以后的色谱分析中。
•
不建议在自己对被别离物质的性质不了解的情况下，
自己摸索色谱条件
编辑课件
色谱柱的分类
1．
根据担体材料分类
〔1〕硅胶型：SiO2；C18；C1三甲基；C2；C4；C8；CN；NH2；
苯基
〔2〕聚合物型：
聚苯乙烯类〔离子交换；凝胶色谱柱〕；
聚丙烯酸酯〔离子交换〕；
聚乙烯醇：C18；离子交换
〔3〕钛柱：比硅胶型的稳定性提高
〔4〕其它类型
编辑课件
色谱柱的分类
2.
根据别离方式分类
(1)正相：SiO2；
CN；NH2；苯基
(2)反相：C18；C1三甲基；C2；C4；C8；CN；
NH2
；苯基
(3)离子交换：弱碱阴离子交换；弱酸阳离子交换
强碱阴离子交换；强酸阳离子交换
(4)凝胶过滤：水溶性凝胶过滤；油溶性凝胶过滤
(5)其它类型：手性柱等编辑课件
色谱柱的分类
3.根据色谱柱尺寸分类
〔1〕10cm～50cm内径为制备柱
〔2〕4cm～8cm内径为标准柱
〔3〕3cm一下内径为小孔柱或微孔柱和
毛细管柱
〔4〕柱长一般为15cm、25cm、30cm；
50cm一般用于制备柱或特殊柱型，5cm一
编辑课件
色谱柱选择方法
1.氨基酸
(1)结构特殊，一般使用离子交换柱别离，
阳离子交换柱是使用最广泛,是最成熟的
方法。别离氨基酸的阳离子柱分为锂型
柱和钠型柱，锂型柱可以别离谷氨酰胺
和谷氨酸。
编辑课件
(2)反相柱也可以别离氨基酸，但不能别离
氨基酸分析
分析条件：
色谱柱：Shim-pakISC-07/S1504Li
〔15cm×4.0mm〕
〔Li型磺酸基，氨基酸分析专用柱
〕
流动相：柠檬酸缓冲溶液，梯度洗
脱
流速：0.3ml/min
柱温：55℃
检测器：荧光〔编辑课件
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