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关于细胞周期测定问题的解答

细胞周期的研究是细胞生物学的重要研究课题，在某些工作中，如对于肿瘤

的研究等也常会涉及到细胞周期长短的测定。因此，在近几年的高考及各地的竞

赛试题中，时常会出现与细胞周期测定相关的试题。现将细胞周期测定的基本方

法和相关问题的解答方法作一梳理，供高考复习参考。

测定细胞周期时间的基本原理是选择细胞周期中有变化规律的物质作标记，

通过观察这些标记物在细胞周期中的变化，间接计算细胞周期及各时相的时间。

一、标记有丝分裂比率法

标记有丝分裂比率法（PLM）是最经典的测定细胞周期各时相时间的方法。

其实验过程是：利用3H-TDR（TDR：胸腺嘧啶核苷）短暂的脉冲标记待测细胞

群体，然后洗脱标记物，置换新鲜培养液继续培养。随后，每隔半小时或一小时

定期取样，进行细胞放射自显影，以M期的3H-TDR标记指数为指标，测定有

丝分裂细胞中已被标记的细胞比率，根据该比率变化发生的时间，计算细胞周期

及各时相的时间。

结果分析方法如下：（1）当脉冲标记后，因3H-TDR只掺入到S期细胞中，

在该段时间内已处于S期的细胞被标记，处于其他时期的细胞均无标记。由于S

期细胞经G2期才进入M期，所以一段时间内标记有丝分裂百分数为0（图1）。

培养一定时间后，被标记的细胞将陆续进入M期。最先进入M期的标记细胞是

原来处于S期最后阶段的细胞，所以从3H-TDR掺入时起，到开始出现被标记

的M期细胞，就是S期细胞经过G2期到达M期的时间，即为G2期的时间（TG2）。

（2）随着S期细胞逐渐进入M期，标记有丝分裂百分数逐渐上升，到达最高点

时，说明原处于S期最后阶段的细胞已完成M期，进入G1期。所以从开始出

现标记的M期细胞到标记有丝分裂百分数达到最大值之间所经历的时间为M期

的时间（TM）。（3）由于S期的持续时间长于M期，所以标记有丝分裂比率的

高峰要维持一定时间，直到处于S期最初阶段的细胞进入M期为止。当标记有

丝分裂比率开始下降时，表明紧跟S期细胞后面的G1期细胞开始进入M期，

所以从开始出现标记的M期细胞到标记的有丝分裂比率开始下降的时间间隔为

S期的时间（TS）。（4）当S期标记细胞经过一个细胞周期再次进入下一个细胞

周期的M期时，又重复前一个循环的过程。第一次出现标记细胞和第二次出现

标记细胞之间所持续的时间间隔为细胞周期时间（TC）。G1期的时间（TG1）可

由TC－（TS+TG2+TM）算出。

也可采用BrdU取代3H-TDR标记细胞，检测被标记的细胞可用抗BrdU抗

体作免疫细胞化学染色。_______________

二、流式细胞技术测定细胞周期

流式细胞技术的基本原理是细胞经DNA特异性荧光染色后，被分离的单个

细胞逐个通过流式细胞仪的荧光探测装置，记录每个细胞的荧光强度。由于每个

细胞结合的染料与DNA含量成正比，所以每个细胞受激发后发射的特异性荧光

强度与它的DNA含量成正比。由于G1期细胞的DNA含量为2C，G2和M期

细胞DNA含量为4C，S期细胞的DNA含量为2~4C，因此可以根据DNA含量

的不同分选出处于不同时相的细胞，然后通过统计算出细胞各时相所占的百分

比，从而确定细胞周期的时间长短。

三、相关试题的解答方法

关于细胞周期测定问题的解答，下面以实例说明之。

[例1]在某生物细胞培养液中加入用3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸，短暂

培养一段时间后，洗去3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸。使在该段时间内已处于

DNA复制期不同阶段的全部细胞中DNA被3H标记，而当时处于其他时期的细

胞则不带标记。不同时间取样做细胞放射性自显影，找出正处于有丝分裂的分裂

期细胞，计算其中带3H标记的细胞占有丝分裂细胞的百分数。得到图2（图甲～

图丁中横轴为时间，纵轴为带标记细胞占总细胞数的百分数）：

（1）图乙中a点开始检测到_____带3H标记分裂期细胞，则O~a为_____

期，理由是：__________。

（2）图乙中b点带3H标记分裂期细胞数开始达到最大值，则a~b段表示

_____期，理由是：_____。

（3）图丙中c点时，带标记的细胞百分数开