细胞化学染色检验.ppt

二甲基联苯胺法：过氧化氢新生态氧过氧化物酶二氨基联苯胺不溶性沉淀第31页,共43页，星期六，2024年，5月正常细胞染色反应1.粒细胞系统分化差的原始粒细胞为阴性分化好的原始粒细胞至成熟粒细胞各阶段均呈阳性。阳性程度随细胞成熟增强。嗜酸性粒细胞阳性最强，嗜碱性粒细胞阴性。第32页,共43页，星期六，2024年，5月2.单核细胞系统：阴性或弱阳性3.其他细胞：淋巴、红系、巨核系均为阴性，浆细胞，组织细胞可阴性，可阳性。第33页,共43页，星期六，2024年，5月临床意义辅助诊断急性白血病的首选，主要用于鉴别急性髓细胞白血病和急性淋巴细胞白血病。第34页,共43页，星期六，2024年，5月急性淋巴细胞白血病：原始淋巴细胞及幼稚细胞均呈阴性，实际上急性淋巴细胞患者骨髓中可残留部分原始粒细胞，而出现阳性，故参考范围为阴性或阳性3%第35页,共43页，星期六，2024年，5月急性粒细胞白血病：原始粒细胞阴性或阳性，常阳性，为+~++，阳性颗粒数较多，颗粒较粗大，急性早幼粒细胞白血病：早幼粒细胞呈强阳性，+++~++++急性单核细胞白血病：原始单核和幼稚单核细胞呈阴性或弱阳性，其阳性颗粒少而细小。第36页,共43页，星期六，2024年，5月急性红白血病：原始粒细胞呈阳性或阴性，原始单核细胞呈阴性或弱阳性，有核红细胞呈阴性中性成熟粒细胞POX活性下降：见于骨髓异常增生综合征、放射病、退化的中性粒细胞及某些白血病。第37页,共43页，星期六，2024年，5月应用评价POX染色是急性白血病形态学分型中最重要、首选的常规细胞化学染色。POX染色涂片上细胞结构不如瑞氏染色清楚，且阳性细胞中已有阳性颗粒覆盖，一定程度上干扰白细胞颗粒判断。第38页,共43页，星期六，2024年，5月POX染色测定MPO的敏感性明显低于流式细胞术对MPO测定，所以POX染色阴性的患者并不等于白血病细胞中不存在此酶，需用流式细胞术进行确认。第39页,共43页，星期六，2024年，5月苏丹黑染色苏丹黑B（sudanblackB，SBB）是一种脂溶性的重氮染料，能溶解细胞内的含脂结构（如中性脂肪、磷脂、糖脂和类固醇），而使脂类物质显示出来，呈深黑色或棕色，脂类物质在粒细胞中丰富，单核细胞少量。第40页,共43页，星期六，2024年，5月正常血细胞的染色反应和临床意义基本同POX染色第41页,共43页，星期六，2024年，5月应用评价虽然SSB染色临床意义与POX染色基本相同，但其敏感性和特异性存在差异。SSB特异性低于POX染色，敏感性高于POX染色。第42页,共43页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第43页,共43页，星期六，2024年，5月PowerBar中国专业PPT设计交流论坛关于细胞化学染色检验细胞学和化学结合的一门科学。以细胞形态学为基础，结合运用化学反应原理对细胞内的各种化学物质（包括酶类、脂类、糖类、铁、蛋白质、核算等）作定性、定位、半定量分析的方法。第2页,共43页，星期六，2024年，5月临床应用辅助判断急性白血病的临床类型。根据细胞化学染色结果不同，可推断细胞所属系列。辅助血液系统疾病的诊断和鉴别诊断。由于血细胞在病理情况下，其化学成分及含量发生变化，可以辅助疾病的诊断，如中性粒细胞碱性磷酸酶染色、铁染色等。第3页,共43页，星期六，2024年，5月细胞染色的基本步骤固定为了保持细胞结构和化学成分的不变，需要对细胞进行固定。分为物理法和化学法物理法：干燥和火焰固定化学法：蒸气固定和液体固定，如甲醛、乙醇、甲醇、丙酮。第4页,共43页，星期六，2024年，5月有色沉淀反应通过不同化学反应，是被检测物质最终形成稳定的有色沉淀。1）偶氮偶联法：含苯酚的底物，在相应酶的作用下释放出萘酚，萘酚与重氮盐结合，偶氮偶联形成相应颜色的沉淀物。2）普鲁士蓝反应：细胞内、外的铁与酸性亚铁氰化钾作用，形成如亚铁氰化钾蓝色沉淀。第5页,共43页，星期六，2024年，5月3）雪夫反应：过碘酸氧化细胞内糖类中的乙二醇基形成乙二醛基，醛基与雪夫试剂作用，使无色品红形成红色沉淀物。第6页,共43页，星期六，2024年，5月复染目的在于使各种细胞能显示出来便于辨认。选择复染液的颜色应与有色沉淀的颜色有明显对比度既能使细胞结构显示又能清楚的看出细胞化学染