纤维素微生物的分离.ppt

关于纤维素微生物的分离1、纤维素在生物圈的分布状况？2、纤维素酶的组成及作用？纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即CX酶、C1酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。一、纤维素和纤维素酶第2页,共31页，星期六，2024年，5月例：下列作物中，纤维素含量最高的是（）A、棉花B、亚麻C、秸秆D、朩材A、棉花例：微生物体内能使纤维素分解成纤维二糖的酶是。C1酶和CX酶第3页,共31页，星期六，2024年，5月例：要将能分解纤维素的细菌从土壤中分离出来，应将它们接种在（）A、加入指示剂的鉴别培养基上B、含有蛋白胨的固体培养基上C、只含纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上D、含四大营养要素的培养基上第4页,共31页，星期六，2024年，5月纤维素1、培养基：以_______为惟一碳源的选择培养基。纤维素酶纤维素分解菌红色消失，出现透明圈刚果红纤维素红色复合物刚果红染色法2、鉴别筛选的原理：二、纤维素分解菌的筛选即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。第5页,共31页，星期六，2024年，5月例:在加入刚果红的培养基中会出现透明圈，产生的透明圈是（）A、刚果红与纤维素形成的复合物B、刚果红与纤维二糖形成的复合物C、纤维素分解后形成的葡萄糖导致的D、以纤维素分解菌为中心形成的第6页,共31页，星期六，2024年，5月课题2是将土样成的菌悬液直接涂布在以尿素为惟一氮源的选择性培养基上，直接分离得到菌落。本课题通过选择培养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本一致.1、本实验的流程与课题2中的实验流程有哪些异同？三、实验操作土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落第7页,共31页，星期六，2024年，5月三、实验操作土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落2.为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？这样的环境中，纤维素分解菌的含量相对高第8页,共31页，星期六，2024年，5月三、实验操作土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约10cm左右腐殖土壤中。3.将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？第9页,共31页，星期六，2024年，5月三、实验操作土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落目的？“选择培养”是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定。思考：为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？选择培养使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用.第10页,共31页，星期六，2024年，5月选择培养参照课本29页旁栏中的比例配置，回答下列问题：a、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？b、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，是如何进行选择的？c、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用是液体培养基，原因是配方中无凝固剂有选择作用，本配方中以纤维素为唯一碳源，所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖.用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照第11页,共31页，星期六，2024年，5月刚果红染色法方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应方法二：在倒平板时就加入刚果红染色法优点缺点方法一方法二操作繁琐，刚果红会使菌落之间发生混杂操作简便，不存在菌落混杂问题透明圈的产生基本上是纤维素分解菌的作用透明圈的产生可能是产淀粉酶的细菌，也可能是能降解色素的细菌的作用第12页,共31页，星期六，2024年，5月挑选产生透明圈的菌落参照课本刚果红染色法，挑选产生透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落单菌落挑取第13页,共31页，星期六，2024年，5月为确定得到的菌是否是纤维素分解菌，还需