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?紫外-可见分光光度法紫外-可见吸收光谱朗伯-比耳定律紫外-可见分光光度计分析条件选择测定方法在医学检验中应用紫外可见分光在医学检验中的应用第1页

紫外-可见分光光度法(ultraviolet-visiblespectrophotometry,UV-VIS)按所吸收光波长区域不一样,分为紫外分光光度法和可见分光光度法,合称为紫外-可见分光光度法。它是利用物质分子或离子对某一波长范围光吸收作用,对物质进行定性分析、定量分析及结构分析,所依据光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长光而产生吸收光谱。紫外可见分光在医学检验中的应用第2页

紫外-可见分光光度法特点:1与其它光谱分析方法相比,其仪器设备和操作都比较简单,费用少,分析速度快;2灵敏度高;3?选择性好;4精密度和准确度较高;5用途广泛。?紫外可见分光在医学检验中的应用第3页

§1.紫外-可见吸收光谱1.物质对光选择性吸收物质对光吸收是选择性,利用被测物质对某波长光吸收来了解物质特征,这就是光谱法基础。紫外可见分光在医学检验中的应用第4页

经过测定被测物质对不一样波长光吸收强度（吸光度）,以波长为横坐标,吸光度为纵坐标作图,得出该物质在测定波长范围吸收曲线。如图3-1；在吸收曲线中,通常选取最大吸收波长λmax进行物质含量测定。紫外可见分光在医学检验中的应用第5页

2有机化合物紫外-可见吸收光谱与紫外-可见吸收光谱相关电子有三种，即形成单键σ电子、形成双键π电子以及未参加成键n电子。跃迁类型有:σσ*、nσ*、ππ*、nπ*四种。2.1有机化合物电子跃迁紫外可见分光在医学检验中的应用第6页

饱合有机化合物电子跃迁类型为σ→σ*,n→σ*跃迁,吸收峰普通出现在真空紫外区,吸收峰低于200nm,实际应用价值不大。不饱合机化合物电子跃迁类型为n→π*,π→π*跃迁,吸收峰普通大于200nm。紫外可见分光在医学检验中的应用第7页

生色团:是指分子中能够吸收光子而产生电子跃迁原子基团。人们通常将能吸收紫外、可见光原子团或结构系统定义为生色团。见表3-1和3-2。助色团:是指带有非键电子正确基团，如-OH、-OR、-NHR、-SH、-Cl、-Br、-I等，它们本身不能吸收大于200nm光，不过当它们与生色团相连时，会使生色团吸收峰向长波方向移动，而且增加其吸收强度。见表3-4。紫外可见分光在医学检验中的应用第8页

红移和紫移在有机化合物中,经常因取代基变更或溶剂改变,使其吸收带最大吸收波长λmax发生移动。向长波方向移动称为红移(表3-3),向短波方向移动称为紫移。紫外可见分光在医学检验中的应用第9页

2.2有机化合物吸收带吸收带(absorptionband):在紫外光谱中,吸收峰在光谱中波带位置。依据电子及分子轨道种类,可将吸收带分为四种类型。R吸收带K吸收带B吸收带E吸收带紫外可见分光在医学检验中的应用第10页

3无机化合物紫外-可见吸收光谱

镧系和锕系元素离子对紫外和可见光吸收是基于内层f电子跃迁而产生。其紫外可见光谱为一些狭长特征吸收峰,这些峰几乎不受金属离子配位环境影响。1.f电子跃迁吸收光谱紫外可见分光在医学检验中的应用第11页

过渡金属电子跃迁类型为d电子在不一样d轨道间跃迁,吸收紫外或可见光谱。这些峰强烈受配位环境影响。比如cu2+以水为配位体,吸收峰在794nm处,而以氨为配位体,吸收峰在663nm处。这类光谱吸收强度弱,较少用于定量分析。2.d电子跃迁吸收光谱紫外可见分光在医学检验中的应用第12页

3.电荷迁移光谱一些分子既是电子给体,又是电子受体,当电子受辐射能激发从给体外层轨道向受体跃迁时,就会产生较强吸收,这种光谱称为电荷迁移光谱。如苯酰基取代物在光作用下异构反应。紫外可见分光在医学检验中的应用第13页

1.4影响紫外-可见吸收光谱原因

物质吸收光谱与测定条件有亲密关系。测定条件（温度、溶剂极性、pH等）不一样,吸收光谱形状、吸收峰位置、吸收强度等都可能发生改变。1.温度在室温范围内,温度对吸收光谱影响不大。紫外可见分光在医学检验中的应用第14页

2.溶剂注意以下几点:（1）尽可能选取低极性溶剂；（2）能很好地溶解被测物，