靶向卵巢癌叶酸受体α的CAR-NK-92细胞构建及功能鉴定.pdfVIP

靶向卵巢癌叶酸受体α的CAR-NK-92细胞构建及功能鉴定.pdf

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JMePWmVolNolJanuary

(/仍,.34,.,,2021

论著

(基础研究)

靶向卵巢癌叶酸受体的--92细胞构建

aCARNK

及功能鉴定

杨宇,敖翔,李伟强,郭樺,谭燕,敖罗权,何敏,王证程,徐祥,郭建新

卵巢叶酸受体在上皮性卵巢癌中高表达。文章拟构建靶向的嵌合抗原受体()修饰

[摘要]目的a(aFR)aFRCAR

细胞(并验证其对阳性粑细胞的杀伤效能,为卵巢癌的临床治疗提供新策略:选择偏

NK-92NK-gZ-afR-CAR),cxFR方法

爱密码子技术设计人源化抗aFR抗原的CAK分子基因;构建慢病毒表达载体pLemi-aFR-CAR;包装慢病毒并感染NK-92细

胞、及流式细胞术检测分子在细胞中的表达效率释放实验和检测

;WWemhlolqPCRaFR-CARNK-92=LDHELISANK-92-

细胞对阳性卵巢癌细胞的杀伤活性。结果双酶切重组质粒》见分子质量和{分

aFR-CARaFRpLenti-aFR-CAR1aFR-CAl

子一致的基因片段和证明分子在细胞中确有表达,并且经嘌呤霉素筛选后,

。WesternblolqPCKaFR-CARNK-92cxFR-CAR

的表达效率超过90%。NK-92-ah’K-CAK细胞对卵巢癌细胞的杀伤效应及细胞因子分泌水平呈抗原依赖性,即肿瘤细胞表面

丨表达水平越高,细胞对其杀伤效应越强。细胞勻细胞或细胞共培养

cxK{INK-92-oiFK-CAKNK-92-aFI?-CARSK-OV-3A2780

后,其丨分泌水平5(丨)较细胞(

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