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产β-D-葡萄糖苷酶酵母菌的筛选及产酶性质研究
王彩肖;武伟伟;李艳
【摘要】Intheexperiments,p-nitrophenyl-β-D-glucoside(pNPG)wasused
toselectyeaststrainswithβ-D-glucosidase-producingcapacity,thenβ-D-
glucosidaseactivitywasanalyzedquantitatively.Thoseβ-D-glucosidase-
producingyeaststrainswereidentifiedbyRFLPanalysisof5.8SrDNA-ITS
region.Theβ-D-glucosidase-producinglocationoftheyeaststrainswas
determinedthroughbreakingthecellwallanddetectingtheenzyme
activity.Furthermore,salicinandesculinwereusedasinductorsto
domesticateyeaststrainsandfurthertoimproveβ-D-glucosidase-pro-
ducingcapacity.Theresultssuggestedthat,210β-D-glucosidase-
producingstrainsselectedamong236nativeyeaststrainsbelongedto
fourmoleculartypesincludingHanseniasporavineae,Saccharomyces
cerevisiae,HanseniasporauvarumandPichiacaribbica;amongthem,there
wereeightstrainsproducingβ-D-glucosidasewithhighacitivity,andthe
activityrangedfrom0.0075U/mLto0.0099U/mL(enzyme-producing
loca-tionpositioning,extracellularenzymeintracellularenzymecellwall
enzyme);salicincouldonlyinduceS4strainanditsenzymeactivityin-
creasedby14%,however,esculincouldinduceS1strainandS4strainand
theirenzymeactivityincreasedby13%and19%,respectively.Theeight
strainsscreenedinthisstudycouldbeusedintheproductionofgrape
wine.%以对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷(pNPG)法筛选产酶菌株,并进行酶活力定量
分析。对产酶菌的种属定性采用5.8SrDNA-ITS区域RFLP分析的分子鉴定法。
通过细胞破壁检测酶活力测定菌株的产酶定位。利用水杨苷和七叶苷为诱导物驯化
菌株,提高其产酶能力。结果表明,从236株自选酵母菌中筛选出210株产酶菌
株,区分为4种分子类型,分别为:有孢汉逊酵母属(Hanseniasporavineae)、
酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、葡萄汁有孢汉逊酵母
(Hanseniasporauvarum)和卡利比克毕赤酵母(Pichiacaribbica)。产酶活
性较高的8株酿酒酵母酶活性在0.0075~0.0099U/mL之间,产酶定位均为:胞
外酶>胞内酶>胞壁酶。水杨苷只对S4菌株产酶具有诱导作用,酶活力提高14%。
而七叶苷可对S1和S4菌株产酶具有诱导作用,酶活力分别提高13%和19%。本
研究筛选出8株高产β-D-葡萄糖苷酶的酿酒酵母,可用于生产葡萄酒。
【期刊名称】《酿酒科技》
【年(卷),期】2014(000)010
【总页数】6页(P14-18,2
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