细菌染色和涂片观察的方法.ppt

③、选择抗菌药物：GP菌和GN菌在细胞壁等结构上有很大差别，因而对抗菌药物的敏感性不同。如大多数GP菌对青霉素、红霉素、头孢菌素等敏感；而大多数GN菌对这几种抗生素不敏感，但对链霉素、氯霉素、庆大霉素、卡那霉素等敏感，故临床上可根据病原菌的革兰氏染色性，选择有效的药物进行治疗。第31页,共49页，星期六，2024年，5月2、抗酸染色法有些细菌如结核杆菌、麻风杆菌等分枝杆菌，用一般染色法不易着色，必须使用强染色剂（如石炭酸复红）并采用加热和延长染色时间的方法才能使其着色。且一旦染上颜色后又不易被酸性酒精脱色。这种能够抵抗酸性酒精脱色的细菌，称为抗酸杆菌。应用这种原理进行染色的方法叫抗酸染色法。抗酸染色法常用的有萋—纳二氏染色法和潘本汉氏染色法。第32页,共49页，星期六，2024年，5月①染色的步骤：

直接涂片法第33页,共49页，星期六，2024年，5月夹层杯液基集菌法：第34页,共49页，星期六，2024年，5月固定——→初染——→脱色——→复染石炭酸复红加热3%盐酸酒精吕氏美兰第35页,共49页，星期六，2024年，5月染色过程中的细菌颜色变化：抗酸杆菌非抗酸杆菌第36页,共49页，星期六，2024年，5月第37页,共49页，星期六，2024年，5月镜检与报告：用光学显微镜镜检(目镜10×，油镜100×)染色痰片。在淡蓝色背景下，抗酸杆菌呈红色，其它细菌和细胞呈蓝色。所见结果按下列标准报告：1)抗酸杆菌阴性：连续观察300个不同视野，未发现抗酸杆菌。2)抗酸杆菌(1+)：1～9条抗酸杆菌／100视野。3)抗酸杆菌(2+)：l一9条抗酸杆菌／10视野。4)抗酸杆菌(3+)：1～9条抗酸杆菌／每个视野。5)抗酸杆菌(4+)：≥10条抗酸杆菌／每个视野。第38页,共49页，星期六，2024年，5月③????抗酸染色的意义：用以鉴别抗酸菌（如结核杆菌和麻风杆菌）和非抗酸菌。第39页,共49页，星期六，2024年，5月（三）、特殊结构染色法细菌的某些基本结构如细胞壁、核质、胞浆颗粒和特殊结构如荚膜、芽孢、鞭毛等，用普通染色法不易着色，须用一些特殊染色法才能染上颜色。特殊染色法主要有荚膜染色法、鞭毛染色法、芽孢染色法、异染颗粒染色法等。这些染色法不仅能使特殊结构着色，还可使特殊结构染成与菌体不同的颜色，有利于观察和区别。第40页,共49页，星期六，2024年，5月第41页,共49页，星期六，2024年，5月第42页,共49页，星期六，2024年，5月在细菌检验工作中，除异染颗粒染色法较常用外，由于其它特殊结构染色法操作费时，费用较高、染色过程要求非常严格，而普通染色法虽不能使特殊结构本身着色，但菌体着色后，荚膜和芽孢部分由于不着色也能显示出来，再加上特殊染色法比较复杂，故日常工作中较少使用这些特殊结构染色法第43页,共49页，星期六，2024年，5月第44页,共49页，星期六，2024年，5月第45页,共49页，星期六，2024年，5月（四）、负染色法

所谓负染色法是指使背景着色而细菌本身不着色的一种染色方法。常用的有墨汁染色法。也可用酸性染料如刚果红或水溶性苯胺黑等进行染色。因酸性染料带负电荷，而细菌本身在近乎中性的环境中也带负电荷，同种电荷相排斥，故染色时菌体不着色，而只能使背景着色。实践中常用墨汁负染色法配合单染色法（如美兰染色法）检查细菌的荚膜，使背景成黑色；菌体呈蓝色；而荚膜不着色，从而使荚膜包绕在菌体周围成为一层透明的空圈。第46页,共49页，星期六，2024年，5月酸性染料染色墨汁染色第47页,共49页，星期六，2024年，5月（五）、荧光染色法

用荧光染料进行染色检查的技术称为荧光染色法。第48页,共49页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第49页,共49页，星期六，2024年，5月关于细菌染色和涂片观察的方法第一节?不染色标本检查法所谓不染色标本检查法是将细菌标本不经染色直接镜检，从而观察生活状态下细菌的形态及运动状况的一种检查方法。这种检查方法虽可看到细菌的大致轮廓，但主要用于观察细菌的动力。第2页,共49页，星期六，2024年，5月一、不染色标本检查法的具体方法1、压滴法2、悬滴法3、毛细管法第3页,共49页，星期六，2024年，5月第二节?染色标本检查法所谓染色标本检查法是用特殊的手段对细菌进行染色，而后再检查其形态、大小、排列方式、染色反应以及特殊结构的一种检查方法,有助于细菌的初步识别或诊断。第4页,共49页，星期六，2024年，5月?细菌染色的一