细菌类生物农药.ppt

苏云金杆菌其他杀虫蛋白迄今,苏云金芽胞杆菌已发现有十几种生物活性成分，如辅助蛋白可以有利于提高晶体蛋白的杀虫活性。如双效菌素(zwitternicinA)除具有增效苏云金芽胞杆菌的杀虫活性外,还具有抑制疫霉和腐霉的生长作用,可用于防治植物病原菌病害的目的存在于苏云金芽胞杆菌细胞内的自身诱导物抑制蛋白(autoinducerinhibitor）可以抑制植物病原菌细胞间信息传递的关键分子，达到降低病原菌毒素基因表达的水平,避免植物致病的产生几丁质酶第32页,共51页，星期六，2024年，5月VIP蛋白（(vegetativeinsecticidialprotein）营养期杀虫蛋白已被视为苏云金芽胞杆菌的第二代杀虫蛋白.但目前对营养期杀虫蛋白的了解还远不及杀虫晶体蛋白。蛋白的杀虫活性高Vip3A对小地老虎毒杀力比cry1A高260倍，对具有（杀虫晶体蛋白）抗性的昆虫有很好的疗效。第33页,共51页，星期六，2024年，5月杀虫基因的应用1多基因－复合杀虫蛋白基因工程菌的构建2转基因植物的构建第34页,共51页，星期六，2024年，5月苏云金杆菌发酵工艺1.发酵工艺一般流程原料→灭菌→微生物培养→浓缩→晶体蛋白的分离→活性测定菌种2.发酵培养基：豆饼粉2.5,淀粉2.0,酵母粉2.0,玉米浆2.0,添加剂Ⅰ号0.1,葡萄糖1.0,KH2PO40.3,CaCO30.1,CaCl20.05,MgCl20.01,CuCl20.005,ZnSO40.002,CoCO30.005第35页,共51页，星期六，2024年，5月3.培养条件温度：28-30，通气量：1:0.5~11第36页,共51页，星期六，2024年，5月固体发酵工艺第37页,共51页，星期六，2024年，5月第38页,共51页，星期六，2024年，5月苏云金芽孢杆菌制剂剂型：粉剂，悬浮剂生产厂家：武汉科诺，扬州绿源，重庆聚立信生物工程有限公司（3000t）山西益尔生物制品有限公司（600t）山东龙口格林生物制品有限公司标准：1964年：在伦敦召开的苏云金杆菌的分析与鉴定会议提出Lc50和标准品的使用1966年：在荷兰，巴斯德研究院用E-61为标准制剂，效价标准为1000IU/mg第39页,共51页，星期六，2024年，5月我国Bt杀虫剂的质量检测技术已基本与国际接轨，现已分别建立了以棉铃虫为试虫和以小菜蛾为试虫的生物测定方法，重现性都很好，变异系数小于20%。1995年6月，我国农业部农药检定所以生物测定为基础下达了我国Bt杀虫剂的部颁标准。第40页,共51页，星期六，2024年，5月质量标准测定死亡率：计算校正死亡率＝(T-C/1-C)×100%转换成Lc50转换为效价：样品效价＝p×S/YP:标准品效价S:标准品Lc50Y:样品Lc50第41页,共51页，星期六，2024年，5月球形芽孢杆菌（B.sephaericus）（防治双翅目昆虫）日本金龟子芽孢杆菌（B.popilliae）（鞘翅目昆虫）缓病芽孢杆菌杆菌（B.lentimorbus）（鞘翅，无伴胞晶体）蜡状芽孢杆菌（B.cereus）（鞘、膜、鳞30多种昆虫，a毒素）森田芽孢杆菌（B.moritai）（双翅目，使幼虫致死、成虫畸形）蜂房芽孢杆菌（B.alvei）（膜翅目、引起欧洲蜜蜂的腐臭病）幼虫芽孢杆菌（B.larvae）嗜虫黏质芽孢杆菌，鳞翅目幼虫有极强的毒力其他杀虫芽孢杆菌粘质沙雷氏菌（Serratiamarcescens）1886年从病蚕体中分离得到，对鳞翅目、叶蝉、飞虱有致病作用，效果不稳定。第42页,共51页，星期六，2024年，5月细菌杀菌剂革兰氏阴性菌和阳性菌两类。革兰氏阴性菌：假单胞菌和放射性土壤杆菌革兰氏阳性菌：芽孢杆菌第43页,共51页，星期六，2024年，5月假单胞菌：如绿脓杆菌、荧光假单胞菌、败血假单胞菌、微球菌抗病机理：抑制和抗菌作用第44页,共51页，星期六，2024年，5月枯草杆菌（Bacillussubtilis）生物农药代谢产物枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质作为杀菌剂，对多种植物病原真菌如多种灰霉病菌、白粉病菌、立枯病菌、枯萎病菌等有很强的抑制作用，能有效提高作物产量，改善作物品质.作为饲料添加剂，随同饲料一起进入机体内发生作用，促进饲料的分解利用，并具有拮抗肠道病原细菌，维护和调节肠道微生态平衡的作用,第45页,共51页，星期六