2.2-2 动物细胞工程——动物细胞融合技术与单克隆抗体-高二生物课件（人教版2019选择性必修3）.pptx

第2章第2节动物细胞工程第2课时：动物细胞融合技术与单克隆抗体

学习目标目标010203结合具体实例，以流程图的形式表示单克隆抗体的制备过程。（科学探究）运用结构与功能观，理解动物细胞融合技术的原理和过程。（生命观念）说明单克隆抗体的特点及应用。（社会责任）

植物体细胞杂交植物细胞融合植物组织培养温故而知新植物体细胞杂交技术跨越不同种植物之间生殖隔离的屏障，克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出新的作物类型。

人细胞鼠细胞红色荧光染料标记的膜蛋白绿色荧光染料标记的膜蛋白细胞融合人鼠杂交细胞37°培养40min细胞融合1970年，动物细胞融合实验请同学们快速阅读课本P48页，回答以下问题：①动物细胞融合的概念；②动物细胞融合的原理；③诱导融合的方法；④融合的结果；⑤动物细胞融合的意义和运用。

一、动物细胞融合技术1.概念：使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。2.结果：形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。3.原理：细胞膜具有一定的流动性4.诱导融合的常用方法：PEG融合法电融合法灭活病毒诱导法5.意义：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能

一、动物细胞融合技术6.应用：(1)细胞融合技术已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。(2)利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。

相关信息1.什么是病毒的灭活？用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程：灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面↓细胞膜被病毒颗粒穿通↓细胞膜连接↓细胞核融合，形成杂交细胞灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。

病毒表面的糖蛋白和一些酶与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。灭活病毒诱导细胞融合的原理相关信息

处理方法诱导手段结果原理请同学们看图对比动物和植物细胞融合的异同：

植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合前的处理方法诱导细胞融合的方法细胞融合成功的标志主要用途意义细胞膜具有一定的流动性、植物细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞电融合法、离心法；聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法再生出细胞壁细胞核的融合获得完整的杂种植株主要用于制造单克隆抗体打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能动物细胞融合技术与植物体细胞杂交的比较

缺陷：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。不能无限增殖产生大量抗体动物体内抗原刺激浆细胞抗体筛选单一B细胞增殖分化抗原不纯抗原不纯早期获得抗体的方法二、单克隆抗体及其应用为解决这一难题，科学家进行了多年的研究和探索。

人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的浆细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个浆细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用克隆单个B淋巴细胞形成细胞群。每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体单一B淋巴细胞细胞群选择克隆产生大量纯度高特异性强的抗体B淋巴细胞不可能无限增殖如何获得大量、单一的抗体？遗憾的是体外培养时，一个B淋巴细胞不能无限增殖如何解决这一问题？B淋巴细胞不能无限增值资料2:二、单克隆抗体及其应用

１：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的思考讨论２：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和无限增殖能力同时具备癌细胞动物细胞融合二、单克隆抗体及其应用

动物细胞培养单克隆抗体动物细胞融合杂交瘤细胞骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体1975年，英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒在前人工作的基础上，充分发挥想象力，设计了一个极富创造性的实验方案：一个极富创造力的方案资料3:既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体二、单克隆抗体及其应用1975年，米尔斯坦和柯勒1984年，诺贝尔生理学或医学奖

二、单克隆抗体及其应用1.单克隆抗体由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。可大量增值的融合细胞可大量增值的骨髓瘤细胞单克隆抗体(由克隆细胞产生的单一抗体）B淋巴细胞

结合图2-16:米尔斯坦和科勒制备单克隆抗体过程的示意图，尝试构建制备单克隆抗体带流程，并思考以下问题：二、单克隆抗体及其应用1.为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？2.会有几种细胞融合方式（只考虑两个细胞融合）？3.杂交瘤细胞是如何筛选出来的？4.是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？5.有几次筛选过程？