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基本技能Ⅷ生物玻片标本的制作
一、目标与任务
本次教学主题
基本技能Ⅷ生物玻片标本的制作
学时
授课班级
授课日期
授课地点
主讲教师
实验目的
1.了解生物玻片标本的类别。
2.掌握徒手切片和石蜡切片技术。
3.掌握涂片、装片标本制作技术
技能分解
生物玻片标本的类别
载玻片和盖玻片
装片标本的制作
涂片标本的制作
压片标本的制作
滴片标本的制作
切片标本的制作
实验操作实训
思政元素
树立正确科学的世界观、人生观、价值观;
具有科学精神;
拥有怜悯之心,具有真善美的眼光
教学方法
讲授法、演示法、讨论法、案例分析法、课堂观摩法、实训法
教学媒体
教材、课件、教案、多媒体、投影仪
二、教学进度
教学
过程
教学内容
教学活动
教学时间
(分钟)
教师
活动
学生
活动
理论知识讲授
一、生物玻片标本的类别
生物玻片标本是生物标本的一个类别,其他类别的生物标本多是观察动植物的整体或部分结构形态,是从宏观上观察研究生物,生物玻片标本则是观察研究生物的某些组织、细胞、细胞器、染色体等,一些个体非常小的生物,也有整体做成玻片标本的,如果蝇、一些微生物等。
根据不同的制作方法,生物玻片标本分为装片标本、涂片标本、压片标本、滴片标本、切片标本五大类。
·装片标本
装片标本是指从生物体上取下来的组织块或直接用个体微小的生物体制成的玻片标本。适于对个体较小的动物、动植物较小组织块的观察研究,如植物表皮细胞装片,人体口腔上皮细胞装片,昆虫的翅、足、口器装片,果蝇的成体、蛹、幼虫、卵装片,微小生物如衣藻、水绵、变形虫、线虫、水螅装片,细菌装片,红色面包霉装片等。
·涂片标本
涂片标本是指从生物体上采集的液体(如血液、骨髓液)均匀地涂抹于载玻片上制成的玻片标本。适于对细胞计数、形态观察等方面的研究,如人类血液涂片、人类骨髓液涂片等;适于制作涂片标本的材料有单细胞生物、小型藻类、血液、骨髓液、细菌培养液、动植物的疏松组织、精巢、花药等。
·压片标本
压片标本是指将生物材料置于载玻片和盖玻片之间,施加一定压力,将组织细胞压散或将细胞压破制成的玻片标本。适于制作压片标本的材料有经过软化处理的植物组织和细胞、植物的生殖细胞、动物的组织和细胞、昆虫的唾液腺细胞和性腺细胞等。
·滴片标本
滴片标本是指把动植物的组织或血液进行处理,制成细胞悬液,滴在载玻片上制成的玻片标本。
适于对细胞中染色体的观察研究。例如,洋葱的染色体玻片标本、人类外周血染色体玻片标本、小白鼠骨髓细胞染色体玻片标本等。
·切片标本
切片标本是指徒手或用切片机直接从生物体上切取的动植物组织薄片制成的玻片标本。
适于对某一组织的结构特征、细胞形态的观察,如植物叶脉切片、植物根尖切片、动物血管切片等。因要求不同,可用刀片进行徒手切片;也可将组织块包埋于石蜡中用切片机进行石蜡切片,切成5~10μm的薄片,供光学显微镜观察;还可将组织块包埋于环氧树脂或甲基丙烯酸中用冰冻切片机进行冰冻切片,切成厚度在20~50nm的超薄切片,专供在电子显微镜下观察。
二、载玻片和盖玻片
(一)载玻片
载玻片是制作生物玻片标本最基本的玻璃器皿。载玻片是用来放置显微观察材料的一种玻璃片或石英片。载玻片一般长7~8cm、宽2.5~3cm,标准厚度为1.1±0.04mm,可用范围最大可达11.2mm,太厚会影响聚光器效能,太薄则容易碎裂。
按其平面上是否有凹陷,分为平面载玻片和凹陷载玻片。根据载玻片四周的光滑度,分为毛边载玻片和磨砂边载玻片。按能否直接在载玻片上写字,分为普通载玻片和记号载玻片。按用途,分为显微载玻片和细胞培养载玻片。
(二)盖玻片
盖玻片是覆盖在载玻片上的观察材料之上的一种更小、更薄的玻璃片。盖玻片起到进一步把材料固定、压薄、使材料不能接触到显微镜的物镜的作用。盖玻片一般为正方形,个别也有长方形、圆形。
三、装片标本的制作
(一)植物装片标本的制作
(1)擦拭。用洁净的细软纱布或擦镜纸把载玻片和盖玻片擦拭干净。
(2)滴加。把载玻片放在试验台上,用滴管在载玻片的中央滴一滴清水。
(3)撕取。用镊子从洋葱鳞片叶内侧撕取内表皮一小块(面积如玉米粒般大小),把其浸入载玻片上的水滴中,用镊子轻轻展平。
(4)加盖。用镊子夹起盖玻片,使它的一边先接触载玻片上的水滴,然后缓缓放下,盖在要观察的材料上。
(5)染色。滴一滴碘液在盖玻片的左侧,用吸水纸从盖玻片的右侧吸引,使染液浸润全部材料。
(6)观察。在显微镜下观察细胞的形状和细胞排列的情况。
(二)动物装片标本的制作
(1)固定。把果蝇成虫放入卡诺固定液中,进行杀生和固定。
(2)保存。把杀死且固定好的果蝇放入70%乙醇中进行短期保存或长期保存。
(3)擦拭。用洁净的细软纱布或擦镜纸把载玻片和盖玻片擦拭干净。
(4)放置。用毛笔选取一只结构完整的
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