6第六章 碳水化合物的测定.ppt

2.1可溶性糖类的提取和澄清2.可溶性糖提取液的澄清中性乙酸铅乙酸锌-亚铁氰化钾溶液硫酸铜-氢氧化钠溶液碱性乙酸铅氢氧化铝溶液(铝乳)活性碳硅藻土……2.1可溶性糖类的提取和澄清2.可溶性糖提取液的澄清——中性乙酸铅铅离子能与很多离子结合，生成难溶沉淀，同时吸附除去部分杂质。它可以除去蛋白质、果胶、有机酸、单宁等杂质。其作用可靠，不沉淀溶液中的还原糖，室温一般不形成铅糖化合物，适用于还原糖样品溶液澄清。缺点脱色能力差，不适用于深色样液。主要适用范围浅色糖及糖浆制品、果蔬制品、焙烤制品等。注意事项铅盐有毒，使用时注意操作规范，注意防护。2.1可溶性糖类的提取和澄清2.可溶性糖提取液的澄清——乙酸锌-亚铁氰化钾利用乙酸锌[Zn(CH3COO)2?2H2O]与亚铁氰化钾反应生成的氰亚铁酸锌沉淀来带走或吸附干扰物。优点除蛋白质能力强；缺点脱色能力差；主要适用范围适用于浅色、蛋白质含量较高的乳制品、豆制品等样液2.1可溶性糖类的提取和澄清2.可溶性糖提取液的澄清——硫酸铜-氢氧化钠组成5份硫酸铜溶液(69.28gCuSO4?5H2O溶于1L水中)和两份1mol/L的氢氧化钠溶液组成；主要适用范围在碱性条件下，沉淀蛋白，适合富含蛋白质的样品溶液澄清。2.1可溶性糖类的提取和澄清2.可溶性糖提取液的澄清——碱性乙酸铅适用范围适用于处理深色糖液，能除去蛋白质、有机酸、单宁等杂质，又能凝聚胶体；缺点生成沉淀量较大，易带走糖，特别是果糖另外过量的碱性乙酸铅易改变糖类旋光度。2.1可溶性糖类的提取和澄清2.可溶性糖提取液的澄清——氢氧化铝及活性炭氢氧化铝溶液(铝乳)主要应用：能凝聚胶体，可用于浅色糖液澄清或作为附加澄清剂使用；缺点：非胶态杂质澄清效果不好。活性碳主要应用：适用于深色提取液，主要用于除色素；缺点：易吸附较多糖类造成损失，如蔗糖损失高达6-8%，因而其应用较少。2.2还原糖的测定还原糖是指具有还原性的糖类，分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离潜醛基的双糖都具有还原性。葡萄糖分子中含有游离醛基，果糖分子中含有游离酮基．乳糖和麦芽糖分子中含有游离的潜醛基，故它们均为还原糖。双糖(如蔗糖)、三糖及多糖(如糊精、淀粉等)，不具还原性，属于非还原性糖，但都可以通过水解而生成相应的还原性单糖，测定水解液的还原糖含量就可以求得样品中相应糖的含量。因此，还原糖的测定是一般糖类定量的基础。低聚糖、多糖→酸或酶→单糖2.2还原糖的测定碱性铜盐法直接滴定法高锰酸钾法铁氰化钾法（自学）其他方法（自学）碘量法3,5-二硝基水杨酸法酶-比色法还原糖的测定方法2.2还原糖的测定——直接滴定法一定量碱性酒石酸铜甲（硫酸铜+次甲基蓝）、乙液（NaOH+酒石酸钾钠+亚铁氰化钾？）等量混合→立即生成天蓝色Cu(OH)2沉淀→沉淀很快消失，成透明深蓝色(?)Cu(OH)2与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色可溶性酒石酸钾钠铜络合物→加热→以次甲基蓝为指示剂→含还原糖的样液滴定→样液中还原糖与酒石酸钾钠铜反应→生成红色的Cu2O沉淀Cu2+全部被还原后→稍过量的还原糖把次甲基蓝还原→溶液由蓝色变为无色→即为滴定终点。据样液消耗量可计算还原糖含量。反应式如下：2.2还原糖的测定——直接滴定法CuSO4+2NaOH=Cu(OH)2↓+Na2SO42.2还原糖的测定——直接滴定法2.2还原糖的测定——直接滴定法从上述反应式(3)可知，1mol葡萄糖可以将6molCu2+还原为Cu+。能否直接用该比例关系进行计算呢？不能！实验结果表明,1mol葡萄糖只能还原5mol多点的Cu2+，且随反应条件而变化。因此，不能根据上述反应式直接计算出还原糖含量。如何解决该问题？用已知浓度葡萄搪标准溶液标定的方法来计算。2.2还原糖的测定——直接滴定法试剂用量少，操作比较简便、快速，滴定终点明显适用于各类食品中还原糖的测定碱性酒石酸铜的氧化能力较强，醛糖和酮糖都可被氧化，所以测得的是总还原糖量；测定酱油、深色果汁等样品时，因色素干扰，滴定终点常常模糊不清，影响准确性。本法是GB方法。适用范围及特点2.2还原糖的测定——直接滴定法说明及注意事项次甲基蓝是如何实现终点的指示呢？次甲基蓝也是一种氧化剂，但在测定条件下氧化能力比Cu2+弱，故还原糖先与Cu2+反应，Cu2+完全反应后，稍过量的还原糖才与次甲基蓝指示剂反应，使之由蓝色变为无色，指示到达终点。碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存，用时才混合。为什么？酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出Cu2O沉淀，