一种利用高效液相色谱仪测定灭螨醌和羟基灭螨醌的方法 .pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN103901148A

(43)申请公布日2014.07.02

(21)申请号CN201410123413.9

(22)申请日2014.03.31

(71)申请人曾铭

地址510800广东省广州市花都区风华路13号

(72)发明人曾铭喻零春蒋小良陈梅

(74)专利代理机构广州中浚雄杰知识产权代理有限责任公司

代理人刘各慧

(51)Int.CI

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

一种利用高效液相色谱仪测定灭螨

醌和羟基灭螨醌的方法

(57)摘要

本发明公开了一种利用高效液相色

谱仪测定灭螨醌和羟基灭螨醌的方法，包

括如下步骤：将样品中可食部分切碎，捣

碎，混匀，称取样品于离心管中，加入正

己烷和乙酸乙酯，均浆提取，加入无水硫

酸钠，再均浆提取，离心处理，取上清液

加入到梨形瓶中，在水浴旋转浓缩至微

干，加入正己烷和乙酸乙酯，超声溶解得

到样品；加样前先用预淋洗萃取柱，然后

取提取液转移到净化柱上，再用正己烷和

乙酸乙酯混合液洗涤梨形瓶并转移入萃取

柱，收集全部流出液；于水浴氮吹干；用

流动相溶解并定容到1-2mL，经0.45μm滤

膜过滤，滤液作为待测样液；按色谱条件

利用高效液相色谱仪进行测定。本发明的

方法能准确的检测出灭螨醌和羟基灭螨醌

的含量。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

2021-03-12未缴年费专利权终止未缴年费专利权终止

2015-11-11授权授权

2014-07-30实质审查的生效实质审查的生效

2014-07-02公开公开

权利要求说明书

1.一种利用高效液相色谱仪测定灭螨醌和羟基灭螨醌的方法，其特征在于包括如下

步骤：将样品中可食部分切碎，捣碎，然后混匀，准确称取精确到0.01g的样品于

100mL离心管中，加入体积比为1:1的正己烷和乙酸乙酯，用高速组织捣碎机在

11500-12000r/min的转速下，均浆提取1-2min，加入无水硫酸钠，再均浆提取1-

2min，在3500-4000r/min的转速下离心5-7mim，取上清液加入到50mL梨形瓶中，

在38-40℃水浴旋转浓缩至微干，加入的体积比为1:1的正己烷和乙酸乙酯，超声

30s-35s充分溶解得到样品；

加样前先用体积比为1:1的正己烷和乙酸乙酯预淋洗萃取柱，然后从上述梨形瓶中

取提取液转移到净化柱上，再用体积比为1:1的正己烷和乙酸乙酯混合液洗涤梨形

瓶并转移入萃取柱，转入流速为1.5-2mL/min，收集全部流出液；于38-40℃水浴

氮吹干；用流动相溶解并定容到1-2mL，经0.45μm滤膜过滤，滤液作为待测样液；

按色谱条件利用高效液相色谱仪进行测定；如溶液色谱图在14.5-16min之间出现

波峰，则样品中含有羟基灭螨醌，如溶液色谱图在17.5-19min之间出现波峰，则

样品中含有灭螨醌；

其中，色谱条件为：

色谱柱：ZORBAXSB-C18色谱柱(250mm×4.6mm，10μm)，柱温室温25℃，进样

量20μL；

流动相：乙腈:0.1%磷酸=90:10（体积比），流速1.0mL/min，等度洗脱；

检测器：二极管阵列检测器，检测波长250nm，采用色谱峰的保留时间定性，外

标法定量。

2.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱仪测定灭螨醌和羟基灭螨醌的方法，其

特征在于：检测波长的确定方法是：取灭螨