微生物学检验技术 课件 24项目二十四：厌氧菌鉴定.pptx

项目二十四

厌氧菌鉴定;;;概述;有芽胞厌氧菌只有1个属即梭菌属。

破伤风梭菌

产气荚膜梭菌

肉毒梭菌

艰难梭菌;共同特点;一、破伤风芽胞梭菌

（一）生物学特性

1.形态与染色

菌体细长G+杆菌，周鞭毛，无荚膜。芽胞大于菌体，位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状，为本菌的典型特征。;2.培养特性

专性厌氧，在血平板上可呈薄膜状生长，菌落半透明、灰白色、边缘疏松似羽毛状，伴β溶血。在庖肉培养基中，肉渣变黑，有腐败性恶臭。

3.生化反应

大多生化反应阴性。

4.抵抗力

很强，土壤中可存活数十年，能耐干热150℃1h，煮沸100℃1h方可杀灭。繁殖体对青霉素敏感。;（二）微生物学检验

根据破伤风病人典型的临床表现即可诊断，特殊需要时才进行细菌学检查。

1.标本从可疑的感染伤口采取浓汁、组织液或坏死组织块等。

2.鉴定

直接涂片

厌氧培养

毒力试验;（三）临床意义

感染途径：创伤

感染条件：厌氧微环境

致病物质：破伤风痉挛毒素和破伤风溶血毒素

典型症状：牙关紧闭、苦笑面容、角弓反张;12;破伤风痉挛毒素作用机理;防治原则：

及时处理伤口,扩创、清创

人工自动免疫，白百破三联菌苗（DPO）或类毒素

人工被动免疫，紧急预防注射破伤风抗毒素(TAT)，大剂量青霉素（四环素、红霉素）及使用镇静解痉药作对症处理。;二、产气荚膜梭菌

（一）生物学特性

1.形态与染色

G+粗大杆菌，无鞭毛，在机体内可形成明显的荚膜。芽胞直径小于菌体宽度，位于中央或近极端。;2.培养特性

生长迅速，代谢活跃，45℃生长最好

血琼脂平板：双层溶血环

卵黄琼脂平板：Nagler反应（α毒素）

牛奶培养基：“汹涌发酵”;Nagler反应

产气荚膜梭菌在卵黄琼脂平板上，由于细菌可产生α毒素（卵磷脂酶）分解卵磷脂，使菌落周围出现乳白色浑浊圈，是鉴定本菌的简易方法。;3.生化反应

发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖和甘露醇，产酸产气

明胶液化试验（+），H2S试验（+），卵磷脂酶（+）;（二）微生物学检验

1.标本

避免正常厌氧菌群的污染和接触氧气

2.鉴定

涂片镜检:G+大杆菌，有荚膜，白细胞少，并伴有杂菌，有初步诊断价值。

分??培养：厌氧培养，如有菌生长，取可疑菌落进行形态学和生化反应鉴定。;（三）临床意义

感染途径：创伤和消化道

感染条件：厌氧微环境

致病物质：外毒素、多种侵袭性酶和荚膜

所致疾病：气性坏疽、食物中毒、坏死性肠炎;防治原则：

及时处理伤口,扩创、清创

早期可用多价抗毒素血清

抗生素使用

;三、肉毒芽胞梭菌

（一）生物学特性

1.形态与染色

专性厌氧，芽胞直径大于菌体，位于次极端，使细菌呈汤匙状或网球拍状。;2.培养特性

严格厌氧，营养要求不高。

厌氧血平板上形成2-4mm菌落，毛玻璃样，β-溶血。

庖肉培养基中生长能消化肉渣，使之变黑，有腐败恶臭气味。;3.生化反应

生化特性随毒素型不同而有所差异。

4．抵抗力

很强，能耐热100℃1h以上，干热180℃2h高压蒸汽灭菌30min芽胞可被杀死。

肉毒毒素不耐热，经56℃30min可灭活。

;（二）微生物学检验

1.标本

及时取可疑食品、呕吐物、粪便等。

2.鉴定

涂片镜检：G+大杆菌，菌体呈汤匙状或网球拍状。

分离培养：庖肉培养基中能消化肉渣使之变黑，有腐败恶臭气味。

肉毒素检测（+）。

;（三）临床意义

感染途径：创伤和消化道

感染条件：厌氧微环境

致病物质：肉毒毒素（毒性最强）

所致疾病：肉毒素中毒;防治原则：

加强食品管理和监督

食品进食前加热煮沸

治疗应尽早注射多价抗血清;四、艰难梭菌

革兰阳性粗大杆菌，有些菌株有周身鞭毛，芽胞位于菌体次极端，

严格厌氧，营养要求较高，不易培养。

临床意义：假膜性肠炎;艰难梭菌是人类肠道中的正常菌群，当长期使用氨苄青霉素、头孢菌素、红霉素、氯林可霉素以及抗肿瘤化学制剂引起菌群失调，引发抗生素相关性腹泻（假膜性结肠炎）。

临床表现：严重腹泻、腹痛、伴有全身中毒症状，常并发有毒素性巨结肠的形成。

治疗：可用万古霉素或甲硝唑，并口服调整正常菌群的制剂。;（一）脆弱类杆菌

占临床厌氧菌分离株的25%，居临床厌氧菌分离株的首位。在一定条件下可引起人体内源性感染，如脑脓肿、腹膜炎、阑尾炎、女性生殖系统及盆腔感染。;（二）产黑色素普雷沃菌

条件致病菌，可引起内源性感染，常与其他厌氧菌、需氧菌或兼性厌氧菌引起混合感染。是引起口腔与牙周感染、肺部感染及女性生殖系统感染常见菌之一。;（三）不解糖紫单胞菌

不解糖紫单胞菌主要分布于人类口腔、泌尿生殖道和肠道，在正常人体的检出率较低。主要引起人类牙周炎、牙髓炎、根尖周炎，也可引起胸膜炎、阑尾