微生物学检验技术 课件 33-4综合技能训练：粪便标本微生物检验.pptx

综合技能实训四粪便标本微生物检验

学习目标1．掌握粪便标本的正确采集、运送和微生物检验程序。2．熟悉消化道感染的常见致病菌。3．了解粪便标本中常见致病菌的临床意义。4．具有正确采集粪便标本和进行粪便培养操作的能力。5．能正确选择试验项目对粪便培养标本进行微生物检验，能正确判断和分析试验结果并发出检验报告。综合技能训练四粪便标本微生物检验

思维导图综合技能训练四粪便标本微生物检验

一、粪便标本常见病原菌综合技能训练四粪便标本微生物检验

1、球菌革兰阳性：金黄色葡萄球菌、厌氧链球菌、肠球菌革兰阴性：无?综合技能训练四粪便标本微生物检验

2、杆菌革兰阳性：结核分枝杆菌、产气荚膜梭菌、艰难芽胞梭菌、蜡样芽胞杆菌革兰阴性：沙门菌、志贺菌、致病性大肠埃希菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌、小肠结肠炎耶尔森菌、弯曲菌、类志贺假单胞?综合技能训练四粪便标本微生物检验

3、真菌白色念珠菌?综合技能训练四粪便标本微生物检验

二、检验方法与程序综合技能训练四粪便标本微生物检验

粪便标本的检验操作程序见下图粪便或肛拭子分离培养增菌培养麦康凯或中国蓝/伊红亚甲蓝琼脂平板SS琼脂平板亚硒酸盐增菌培养基（适用于沙门菌属）GN增菌培养基（适用于志贺菌属）SS及麦康凯琼脂平板分离双糖或三糖铁培养基血清学试验生化试验药敏试验报告结果综合技能训练四粪便标本微生物检验

1、粪便标本的采集1）自然排便法2）直肠拭子法?综合技能训练四粪便标本微生物检验

2、粪便标本的运送粪便标本应立即送检，室温保存不能超过2h，如不能立即送检，放入转运培养基中运送和保存，但不能超过24h；疑似霍乱弧菌感染标本，应用碱性蛋白胨水运送保存；疑似艰难芽胞梭菌感染标本，应放入厌氧运送系统中送检。综合技能训练四粪便标本微生物检验

三、培养及鉴定综合技能训练四粪便标本微生物检验

1、涂片检查霍乱弧菌检查：霍乱患者粪便通常呈米泔样，取新鲜标本涂片进行革兰染色，显微镜观察发现革兰阴性杆菌，较小呈直杆状、弧形、香蕉状、逗点状或鱼群状排列，可做出初步报告“找到革兰阴性弧形杆菌，疑似霍乱弧菌”。综合技能训练四粪便标本微生物检验

1、涂片检查假丝酵母菌检查：在载玻片上加1滴生理盐水与标本混合，加盖玻片后直接显微镜观察或者革兰染色后镜检，革兰染色发现阳性卵圆形芽生孢子及假菌丝，可报告“找到假丝酵母菌”。艰难梭菌检查：取疑似抗生素假膜性肠炎患者的粪便涂片，若发现革兰阳性粗大杆菌，无荚膜，大多形成卵圆形芽胞，位于菌体次极端者，可报告“找到革兰阳性芽胞杆菌，疑似艰难梭菌”。综合技能训练四粪便标本微生物检验

1、涂片检查弯曲菌检查：取患者新鲜粪便涂片，干燥固定后革兰染色镜检，若见细小、长而弯的革兰阴性弧形、S形或螺旋形成海鸥状的细菌，可报告“找到弯曲菌”。粪便中优势菌检查：取粪便标本直接涂片，革兰染色后镜检，根据细菌染色性、形态、排列及各自在涂片中所见到的相对比例等，推定主要优势菌并及时报告结果。综合技能训练四粪便标本微生物检验

2、分离培养与鉴定沙门菌及志贺菌培养：取脓血、黏液样粪便或直肠拭子接种SS琼脂平板或XLD琼脂平板，35℃培养18～24h后观察生长现象，取可疑菌落做推断性生化试验，初步生化反应符合两属细菌生物学特性，继续用诊断血清作血清学试验，鉴定出志贺菌及沙门菌的血清群及型，再挑取菌落制成菌悬液，作药敏试验。如生化试验符合沙门菌或志贺菌，但与二者的诊断血清不发生凝集现象，可将待检菌液隔水煮沸1h以破坏K抗原和Vi抗原，再作凝集试验。综合技能训练四粪便标本微生物检验

2、分离培养与鉴定致腹泻性大肠埃希菌培养：引起腹泻的大肠埃希菌主要有5种类型，即肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）、肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）、肠致病性大肠埃希菌（EPEC）、肠出血性大肠埃希菌（EHEC）和肠集聚性大肠埃希菌（EAggEC）。取脓血、水样或糊状粪便接种于血平板及麦康凯（或EMB、中国蓝）琼脂平板，35℃培养18～24h后观察菌落，挑取可疑菌落先按照一般大肠埃希菌作生化反应鉴定，再通过毒力试验或与大肠埃希菌多价血清作玻片凝集试验进行鉴定，同时作药敏试验。综合技能训练四粪便标本微生物检验

2、分离培养与鉴定霍乱弧菌培养：取米泔水样标本，接种于碱性蛋白胨水中增菌培养，6h后取表面菌膜或直接取粪便标本，接种于碱性琼脂平板、庆大霉素琼脂平板或硫代硫酸钠枸橼酸钠胆盐蔗糖（TCBS）琼脂平板，35℃培养18～24h后观察菌落，挑取可疑菌落通过形态学检查、动力及制动试验、血清学试验等进行鉴定。综合技