基因重编程小鼠体细胞及诱导向视网膜神经节样细胞分化的开题报告.pdfVIP

基因重编程小鼠体细胞及诱导向视网膜神经节样细

胞分化的开题报告

题目：基因重编程小鼠体细胞及诱导向视网膜神经节样细胞分化

研究背景和意义：

近年来，基因重编程技术已成为生物医学领域的一个重要研究方向。

该技术可以将体细胞经过人工处理，使其再次表达胚胎干细胞特有的转

录因子，从而重获“干细胞样”特质。同时，小鼠体细胞可以通过基因

重编程转化为诱导性多能干细胞（iPSCs），这一技术的发展为研究多个

疾病提供了很好的平台。本研究将结合基因重编程技术和干细胞学，通

过诱导小鼠体细胞向视网膜神经节样细胞分化，为研究神经损伤相关疾

病提供新的靶点和治疗策略。

研究内容：

1、体外重编程小鼠体细胞，获得iPSCs。

2、定向诱导小鼠iPSCs向视网膜神经节样细胞分化。

3、分析分化后细胞的表型特征和功能，包括形态学、蛋白表达、基

因表达和分子功能等方面。

4、研究分化后细胞在神经损伤模型中是否能够恢复神经功能。

研究方法：

1、细胞培养：使用小鼠尾部细胞，定向表达Oct4、Sox2、Klf4和

c-myc重编程四个转录因子，体外重编程小鼠体细胞获得iPSCs，并进行

体外培养和扩增。

2、诱导分化：使用化学合成物或转录因子定向诱导iPSCs向视网膜

神经节样细胞分化。通过不同组合的诱导剂，调节细胞的分化路径。

3、分子功能研究：使用实时荧光定量PCR对多个神经元特异表达基

因的表达情况进行分析。同时，使用全转录组测序（RNA-Seq）技术来鉴

定分化状态下的特异性基因表达。

4、神经损伤模型：在体内或体外建立神经损伤模型，观察分化后细

胞在神经损伤模型中的免疫美观度和治疗效果。

预期结果：

预计本研究将通过基因重编程技术和干细胞分化技术，成功诱导小

鼠iPSCs向视网膜神经节样细胞分化，并探索细胞在神经损伤模型中的治

疗效果。此外，本研究提供了一个新的方法来研究神经损伤相关疾病。