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吉西他滨时辰给药治疗荷瘤裸鼠的实验研究

王颖彦;常瑞明;常建星

【摘要】目的建立肺癌A549细胞裸鼠皮下注射成瘤模型,按照昼夜的不同时辰给

予吉西他滨,观察其疗效和副作用,初步筛选出最佳给药时间.方法32只裸鼠饲养在

SPF级实验动物房,统一光照条件,光照时间(7:30～19:30),黑暗时间(19:30～7:30),

温度控制在25℃左右,湿度控制在50％左右;收集对数生长期培养的A549细胞,浓

缩成2×107/mL的细胞悬液,在无菌条件下抽取约0.2mL细胞悬液注射至裸鼠皮

下.待肿瘤长到约1cm×1cm×1cm大小,随机分为4组,每组8只.前三组按照时

辰2am、8am、14pm给予吉西他滨(50mg/Kg),隔两天给药一次,持续三周,第

四组给予等量无菌生理盐水作为对照组.每周测量肿瘤体积和裸鼠体重,绘制肿瘤的

生长曲线和体重变化曲线.第30天处死裸鼠,抽血测肝肾功能,留取标本做HE染色

观察镜下改变.结果吉西他滨对A549肺癌裸鼠移植瘤有治疗效果,其中2am组抑

瘤效果最明显,肿瘤生长最慢,裸鼠体重增长最快;8am组抑瘤效果最差,肿瘤生长最

快,裸鼠体重增长最慢.光镜下可见吉西他滨治疗组肺肝肾损伤较对照组减轻,肝肾功

能改善(P＜0.05,8am、14pm组vs.对照组;P＜0.01,2am组vs.对照组);药物治

疗组当中,2am组治疗效果最好,8am组治疗效果最差(P＜0.05,2amvs.8am组).

结论吉西他滨对A549肺癌移植瘤裸鼠有明显的抑瘤作用,而且疗效和副作用呈时

辰节律变化,2am组疗效最佳,8am组疗效最差.

【期刊名称】《岭南现代临床外科》

【年(卷),期】2014(014)004

【总页数】4页(P362-365)

【关键词】时辰化疗;吉西他滨;肺癌A549细胞

【作者】王颖彦;常瑞明;常建星

【作者单位】510120广州广东省中医院药学部;510120广州中山大学孙逸仙纪

念医院急诊科;510120广州中山大学孙逸仙纪念医院外科

【正文语种】中文

【中图分类】R734.2

肺癌是严重威胁人类健康、发病率较高的一种疾病［1］，对于错过手术时机的患

者采取药物化疗是非常重要的手段。尽管多年来化疗药物取得了不错的效果，但其

严重的不良反应如胃肠道反应、骨髓抑制、肝肾功能损害等迫使患者放弃化疗

［2］。

时辰化疗是根据机体生理、生化和病理功能表现的节律性变化，以及药物在体内的

代谢动力学特征、靶器官的敏感性节律等，选择药物疗效最佳、毒副作用最小的最

佳给药时间点进行给药，从而提高疗效，降低副反应，制定出合理的给药剂量和时

间［3］。我们的实验采取肺癌A549细胞注射裸鼠皮下成瘤，观察不同时间给予

吉西他滨的治疗效果及副反应，从而初步筛选出最佳给药时间，为临床医生提供实

验依据。

1材料与方法

1.1实验药物与试剂

注射用吉西他滨（健泽）（批准文号：）购于ELILILLYAND

COMPANY公司；细胞培养所用试剂均购于杭州四季青生物材料公司；实验动物：

裸鼠32只，购于中山大学实验动物中心［许可证号：SCXK（粤）2008－0002］，

雌雄各半；人肺癌A549细胞：购买于中国典型培养物保藏中心。

1.2实验方法

1.2.1肺癌A549细胞培养A549细胞用含有10%的胎牛血清的DMEM培养基置

于37℃、5%的二氧化碳培养箱培养，细胞贴壁率为85%左右时用胰酶消化、传

代、换液，不断扩增细胞数量。

1.2.2建立肺癌A549细胞裸鼠皮下注射成瘤模型：严格穿无菌隔离衣，戴口罩、

帽子，换拖鞋，进入饲养裸鼠的SPF级饲养房，用无菌注射器抽取0.2mL在超净

台中浓缩的细胞悬液（浓度为2×107／mL），接种到局部棉签消毒的裸鼠右肩

胛部皮下，观察注射处无渗液后放回笼中饲养，4～6天后成瘤（成瘤率90%以

上）。

1.2.3实验分组给药等到裸鼠局部肿瘤长到约1cm×1cm×1cm大小，将32只

裸鼠随机分为4组，每组7只。给药组：分别于2am、8am、14pm腹腔注射

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