紫外可见分光光度法 (2).ppt

*第三节紫外-可见分光光度计三、分光光度计的校正通常在实验室工作中，验收新仪器或实验室使用过一段时间后都要进行波长校正和吸光度校正。建议采用下述的较为简便和实用的方法来进行校正：镨铷玻璃或钬玻璃都有若干特征的吸收峰，可用来校正分光光度计的波长标尺，前者用于可见光区，后者则对紫外和可见光区都适用。也可用K2CrO4标准溶液来校正吸光度标度。第31页,共51页，5月，星期六，2024年，5月*紫外吸收光谱的应用1．6．1检定物质检定物质主要根据光谱图上的一些特征吸收，特别是最大吸收波长λmax及摩尔吸收系数ε，是核定物质的常用物理参数A与标准物、标准谱图对照将样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中．在同一条件下分别测定吸收光谱，比较光谱图是否一致。若两者是同一个物质，则两者的光谱图应完全一致。如果没有标准样品，也可以和现成的标准谱图对照进行比较。但这种方法要求仪器准确，精密度高，而且测定条件要相同，否则可靠性较差。第32页,共51页，5月，星期六，2024年，5月*B比较最大吸收波长λmax及吸收系数的一致性由于紫外吸收光谱常只含有2—3个较宽的吸收带，而且紫外光谱主要是分子内的发色团在紫外区所产生的吸收，与分子其它部分关系不大，具有相同发色团的不同分子结构，在较大分子中不影响发色团的紫外吸收光谱，于是不同分子结构有可能有相同的紫外吸收光谱．但是它们的吸收系数是有差别的。如果样品和标准样品的吸收波长相同，吸收系数也相同．可认为样品与标准样品为同一物质。第33页,共51页，5月，星期六，2024年，5月*第34页,共51页，5月，星期六，2024年，5月*1．6．2纯度检查紫外吸收光谱能测定化合物中台有微量的具有紫外吸收的杂质。如果化合物在紫外可见光区没有明显的吸收峰，而它的杂质在紫外区内有较强的吸收峰，就可检出化合物中所含的杂质。例如乙醇中含杂质苯，苯的λmax为256nm，而乙醇在此波长处无吸收。如果化合物在紫外—可见光区有吸收，可用吸收系数来检查它的纯度。例如菲的氯仿溶液在296nm处有强吸收(lgε=4.10)，用某方法精制的菲测得的lgε值比标准菲低l0%，说明实际含量只有90％，其余很可能是杂质。也可利用差示法检查样品的纯度，取相同浓度的纯品在同一溶剂中测定作空白对照，样品与纯品之间的差示光谱就是样品中含有杂质的光谱。第35页,共51页，5月，星期六，2024年，5月*1．6．3推测化合物的分子结构物质的紫外吸收光谱基本上是分子中发色团和助色团的特性，而不是整个分子的特性。所以，单独从紫外吸收光谱不能完全确定化合物的分子结构，必须与红外光谱、核磁共振、质谱及其它方法配合，才能得出可靠的结论。紫外光谱在研究化合物的结构中的主要作用是推测功能团、结构中的共扼关系和共扼体系中取代基的位置、种类和数目等。第36页,共51页，5月，星期六，2024年，5月*A推定化合物的共扼体系、部分骨架如果一个化合物在紫外区是透明的，没有吸收峰(ε＜10)，则说明不存在共扼体系。它可能是脂肪族碳氢化合物、胺，腈、醇等不含双键或环状共扼体系的化合物。如果在210一250nm有强吸收，示有K吸收带，则可能含有两个双键的共扼体系（如共扼二烯或α，β—不饱和酮等)。如果在250一300nm附近有强吸收的K带，则可能具有3—5个不饱和共扼系统。如果在260一300nm有中强吸收(ε＝200—l000)，示有B吸收带，则可能有苯环。如果在250一300nm有中弱吸收(R吸收带)，则可能有羰基。第37页,共51页，5月，星期六，2024年，5月*B区分化合物的构型、构象例如二苯代乙烯，它有下面两种构型：第38页,共51页，5月，星期六，2024年，5月*C互变异构体的检别第39页,共51页，5月，星期六，2024年，5月*D氢键强度的测定在实际应用中，不同的极性溶剂产生氢键的强度不同，可以利用紫外光谱来测定化合物在不同溶剂中的氢键强度，以确定选择哪一种溶剂。例如异丙叉丙酮的nπ*吸收带在环己烷、乙醇、甲醇及水溶剂中的λmax分别为335，320，312和300nm。假定这种λmax的移动完全由溶剂的氢键历引起，则可利用下式计算每种溶剂中的氢键强度。对每种情况，紫外辐射每摩尔能量为第40页,共51页，5月，星期六，2024年，5月*第41页,共51页，5月，星期六，2024年，5月*第42页,共51页，5月，星期六，2024年，5月*1．6．4定量分析