周期性张应变力对幼年和成年及骨关节炎软骨细胞产生糖胺多糖的影响.pdfVIP

周期性张应变力对幼年和成年及骨关节炎软骨细胞产生糖胺多

糖的影响

商鹏;陈维毅;卫小春;李晓娜

【摘要】目的观察周期性张应变力(cyclictensilestrain,CTS)对体外培养的幼年、

成年及骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)兔软骨细胞产生糖胺多糖

(Glycosaminoglycans,GAG)的影响.方法取2月龄雄性新西兰大白兔3只作为幼

年组,5月龄雄性新西兰大白兔10只,随机分2组(即成年组与OA组),每组5只.OA

组采用前交叉韧带切断术(ACLT)制作OA动物模型,成年组仅行双膝关节切开,但不

行ACLT.成年组及OA组动物于术后20周空气栓塞处死,取左侧膝关节标本分别做

大体评分及Mankins评分观察OA造模情况.将三组兔膝软骨细胞进行消化分离

及体外培养.将每个组原代软骨细胞均分别培养于2个BioFlex6孔培养板上,随机

分为对照组细胞和加载组细胞,每组6个样本,同置于培养箱内,加载组每天

CTS(sin10%,0.5Hz,6h/次)作用6h,对照组不予特殊处理.加载组与对照组在首次

加载后24h、48h与72h分别吸取培养细胞上清液,阿尔新蓝染色沉淀法测定上

清液GAG含量,比较各组GAG分泌的变化.结果①实验组动物关节软骨明显退变,

大体评分及Mankins评分均明显高于对照组(P0.05);②与对照各组细胞相比,幼

年、成年及OA组细胞进行加载后其GAG的分泌水平随时间均升高(P0.05);且各

细胞在CTS干预前后GAG分泌随时间变化趋势存在统计学差异(P0.05).结论

Flexercell-4000力学加载系统可对体外培养的软骨细胞施加精确的力学负荷加载,

并从刺激各类软骨细胞产生蛋白多糖.与正常细胞相比,OA软骨细胞对力学刺激的

响应特点发生了较明显的变化.

【期刊名称】《中国现代药物应用》

【年(卷),期】2010(004)016

【总页数】3页(P1-3)

【关键词】软骨细胞;糖胺多糖;应变;应力

【作者】商鹏;陈维毅;卫小春;李晓娜

【作者单位】030001,山西医科大学第二医院骨与软组织损伤修复山西省重点实验

室;太原理工大学应用力学与生物医学工程研究所;030001,山西医科大学第二医院

骨与软组织损伤修复山西省重点实验室;太原理工大学应用力学与生物医学工程研

究所

【正文语种】中文

骨关节炎(OA)是关节疾病中最常见的类型之一。流行病学调查显示中老年人群中，

60%有明显OA的影像学改变。疾病主要累及负重的大关节，其病理过程以关节

软骨基质的降解破坏为特征，1995年国际OA专题会议提出了OA的最新定义，

认为OA是力学和生物学因素共同作用下导致软骨细胞、细胞外基质以及软骨下

骨三者降解和合成正常偶联失衡的结果。可见，软骨细胞代谢的改变是OA病变

发展的关键。而软骨细胞合成、分泌基质活动受到机械应力的调控，异常的应力刺

激会造成软骨细胞功能下降、失调，使基质合成减少，失去正常的更新替换，从而

导致关节退变的启动及发展［1］。同时，人们发现，适宜的应力载荷能够促进软

骨细胞增殖和合成细胞外基质［2，3］，且常常由于体外培养的软骨细胞因培养

条件、取材部位不同，以及所受作用力的形式和大小难以精确掌控而导致实验结果

存在较大差异［4，5］。所以，我们进行了大量的前期研究，发现经过干预的同

一类软骨细胞，其细胞骨架，粘弹性等力学参数均发生改变［6，7］，故推测其

对力学刺激的响应能力也应存在一定差别，而此类研究尚未见报道。对不同年龄及

OA软骨细胞的力学生物学研究，对于揭示软骨组织在生长、成熟与退化过程中，

软骨在细胞分子水平上与力学环境的相互作用特点具有一定意义。本研究通过使用

新型的Flexercell-4000型力学加载系统，对体外培养的不同年龄兔膝关节软骨细

胞施加更为精确的周期性张应变力，观察特定强度的力学刺激对幼年、成年及OA

兔软骨细胞GAG表达的影响。

1材料与方法

1.1实验动物与分组雄性新西兰白兔13只，购自山西医科大学动物实验中心。按

年龄分为幼年(2月龄)3只作为幼年组，以及成年(5月龄)10只，随机分为成年组

及OA组，各5只。

1.2OA模型的制备

1.2.1手术方法OA组:新西兰