组蛋白去乙酰化酶抑制剂诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡及其机制.pdfVIP

组蛋白去乙酰化酶抑制剂诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡及

其机制

李亚洲;宫卫东;张瑞;倪代会;李文献;王执民;吴智群

【摘要】目的研究去乙酰化酶转移酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对人胃癌细胞

SGC-7901的凋亡诱导作用及其机制.方法利用细胞计数、流式细胞仪及末端脱氧

核苷酸转移酶生物素dUTP切口末端标记法(TUNEL)研究TSA对胃癌细胞SGC-

7901的凋亡诱导作用.利用蛋白印迹法、基因芯片及实时定量PCR研究TSA对胃

癌细胞凋亡相关基因表达的影响.结果TSA可诱导胃癌细胞SGC-7901发生凋

亡;TSA可增加胃癌细胞SGC-7901p53,bax等基因的表达,降低BCL-2、生存素和

半胱天冬酶的表达;TSA可使凋亡诱导因子抗侵袭因子(AIF)和核酸内切酶EndoG

从线粒体释放并转移到细胞核内;TSA可通过调控多个凋亡相关基闪的表达诱导胃

癌细胞发生凋亡,且该凋亡是半胱天冬酶非依赖性的.结论TSA可通过调控多个凋亡

相关基因来实现其诱导胃癌细胞凋亡的作用,这种凋亡诱导作用是通过半胱天冬酶

非依赖途径进行的.

【期刊名称】《介入放射学杂志》

【年(卷),期】2010(019)003

【总页数】4页(P220-223)

【关键词】胃癌;去乙酰化酶转移酶抑制剂;肿瘤治疗;制癌作用;凋亡

【作者】李亚洲;宫卫东;张瑞;倪代会;李文献;王执民;吴智群

【作者单位】710038,第四军医大学唐都医院介入放射科;710038,第四军医大学唐

都医院介入放射科;第四军医大学分子生物学教研室;710038,第四军医大学唐都医

院介入放射科;710038,第四军医大学唐都医院介入放射科;710038,第四军医大学唐

都医院介入放射科;710038,第四军医大学唐都医院介入放射科

【正文语种】中文

【中图分类】R735.2

胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，其死亡人数在我国居恶性肿瘤的首位［1］。

手术对早期胃癌有较好的疗效，但对中晚期的胃癌疗效欠佳，近年研究表明组蛋白

去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A（TSA）对肿瘤细胞有明显的抑制作用［2］，且

TSA可呈时间及剂量依赖性抑制胃癌细胞SGC-7901的生长，并诱导胃癌细胞凋

亡［3］。但TSA对胃癌细胞的作用机制尚不完全清楚，我们设计本实验，以研究

TSA对胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用及其机制。

1材料与方法

1．1材料

1．1．1细胞来源及培养胃癌细胞株SGC-7901由第四军医大学细胞生物中心提

供，用含10%胎牛血清、100mg／ml链霉素、100u／ml青霉素的RPMI-

1640（GIBCO公司）培养液在37℃，5%CO2培养箱中培养。

1．1．2TSA购于CellsignalingTechnologyInc．，p53-Ab1鼠抗人单抗、

baxAb-7兔抗人多抗和bcl-2鼠抗人单抗购于NeoMarkers；survivn鼠抗人单

抗购于CellsignalingTech；AIF羊抗人多抗购于SantaCruzBiotechnology，

Inc；EndoG鼠抗人单抗购于Calbiochem；和PARP鼠抗人单抗购于Phar

Minggen；Caspase广谱抑制剂z-VAD．fmk购于Calbiochem

（No．219007）。Agilenthuman1Aoligomicroarraykits（V2）购于

AgilentTechnologies（No．G4110B）。

1．2方法

1．2．1绘制细胞生长曲线取对数生长期的胃癌细胞，胰酶消化成单细胞悬液，

以1×105个细胞接种于培养瓶中培养。对照组细胞用含10%胎牛血清的RPMI-

1640培养液进行培养，处理组的细胞在同样培养液中加TSA使其浓度为400

nmol／L。2～3d换液1次，倒置显微