禽流感和马立克氏病二联活疫苗rMDV-HA病毒株及构建方法[发明专利].pdfVIP

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专利名称：禽流感和马立克氏病二联活疫苗rMDV－HA病毒

株及构建方法

专利类型：发明专利

发明人：吴艳涛,郦晓琼,张小荣,徐晓静

申请号：CN200710133953.5

申请日

公开号：CN101575616A

公开日

摘要：本发明涉及家禽用禽流感和马立克氏病二联活疫苗rMDV－HA病毒株及构建方法。本发明

采用反转录－聚合酶链反应或聚合酶链反应扩增H5亚型禽流感病毒SY株血凝素基因、网状内皮增生

症病毒LTR、筛选标志基因lac/smGFP和马立克氏病毒RispensCVI988疫苗株基因组外源基因并将

其克隆到质粒载体中，得到重组质粒pHA、pLTR、ploxP－lac/smGFP－loxP、pUP和pDOWN，

将转移载体pMHA质粒DNA与从马立克氏病毒RispensCVI988疫苗株感染细胞提取的DNA共转染

鸡胚成纤维细胞，同源重组将外源基因插入到马立克氏病毒RispensCVI988疫苗株基因组，得到带

筛选标志基因的重组病毒rMDV－HA/GFP；由cre酶介导的loxP位点间序列重组去除rMDV－

HA/GFP的筛选标志基因lac/smGFP，纯化后得到rMDV－HA病毒株。成本低、无污染、免疫期

长，可作为禽流感和马立克氏病二联活疫苗病毒株。

申请人：扬州大学

地址：225009江苏省扬州市江阳中路36号

国籍：CN

代理机构：南京中新达专利代理有限公司

代理人：孙鸥

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